UNIFTC
SISTEMA DE GESTÃO DE QUALIDADE
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO - POP
SETOR: Bioquímica
ASSUNTO: Dosagem de Colesterol Total
Identificação: POP 001
Versão: 001
Folha: 1/3
OBJETIVO: Kit para determinação quantitativa do colesterol no soro. Somente para uso diagnóstico in vitro.
RESPONSABILIDADE: Estagiários do setor de bioquímica do Laboratório de Análises Clínicas
(UniFTC) com supervisão do professor.
PRINCÍPIO DO TESTE: Teste Enzimático Colorimétrico para a determinação de Colesterol. Reagente com
FCL (Fator Clareante de Lípides). A enzima colesterol esterase no reagente hidrolisa os ésteres de colesterol
presentes na amostra do paciente, o que produz o colesterol livre. A enzima colesterol oxidase presente no
reagente em presença de oxigênio catalisa a oxidação do colesterol livre o que leva a produção do peróxido
de hidrogênio. A enzima peroxidase também presente no reagente catalisa a reação de oxidação do fenol pelo
peróxido de hidrogênio formado em presença de 4-aminoantipirina, produzindo um composto rosa com
absorção máxima em 505 nm. A concentração desse composto (quinoneimina) e consequentemente a
intensidade da cor são diretamente proporcionais à concentração de colesterol na amostra.
Éster de Colesterol + H2O → Colesterol + Ac. Graxo;
Colesterol + ½ O2 → Colestenona + H2O2;
2H2O2+ 4-Aminoantipirina + Fenol → Quinoneimina + 4H2O
APLICAÇÃO CLÍNICA: O Colesterol é um componente estrutural das paredes das membranas celulares
e precursor de ácidos biliares e hormônios esteroidais. O risco cardiovascular de um paciente está diretamente
ligado ao seu colesterol sérico, principalmente as frações HDL e LDL que apresentam ação direta na formação
de ateromas. O colesterol total engloba todo o colesterol ligado às várias lipoproteínas, sendo cerca de 60 a
70% transportados pela LDL, 20 a 35% pela HDL e 5 a 12% pela VLDL.
AMOSTRA ANALISADA: SORO. O soro deve ser separado até 2 horas após a coleta. Se armazenado sob
refrigeração de 2 a 8 °C, o colesterol é estável por até 72 horas. Se armazenado abaixo de -20 °C, o colesterol
fica estável por até 60 dias.
PADRÕES/CONTROLE:
Os valores de referência do controle patológico e normal devem ser seguidos de acordo com o lote do controle
utilizado. É necessário, antes de iniciar a dosagem do colesterol total, passar os controles (normal e
patológico) para verificar. Logo, se estiverem dentro dos valores de referência expostos no kit, pode iniciar
as dosagens com os soros dos pacientes.
MATERIAL NECESSÁRIO:
• Tubos e pipetas;
• Cronômetro;
EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS:
• Espectrofotômetro UV/VIS;
• Banho-maria ou termostatizador à temperatura constante de 37 °C;
PROCEDIMENTO:
