P O P
TESTE QUALITATIVO PARA A PRODUÇÃO DA ENZIMA
ESTERASE EM MICRO-ORGANISMOS ISOLADOS DE
MANGUEZAIS DO LITORAL DO PARANÁ.
Matheus S. Araujo
Laboratório de Genética Molecular e de
Micro-organismos (LAGEM) – UNESPAR/Paranaguá
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Teste Qualitativo de Esterase em Microrganismos de Manguezais do Paraná, Notas de estudo de Microbiologia
O procedimento para realizar um teste qualitativo para a produção de esterase em microrganismos isolados de manguezais antropizados do litoral do paraná. O documento detalha os materiais necessários, os procedimentos para preparação de isolados, preparo do meio de cultura para teste enzimático, preparo das placas e repique, e visualização dos resultados.
O que você vai aprender
- Como é preparado o meio de cultura para o teste enzimático?
- Quais microrganismos são utilizados no teste?
- Qual é o objetivo do teste descrito no documento?
Tipologia: Notas de estudo
2021
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TESTE QUALITATIVO PARA A PRODUÇÃO DA ENZIMA
ESTERASE EM MICRO-ORGANISMOS ISOLADOS DE
MANGUEZAIS DO LITORAL DO PARANÁ.
Matheus S. Araujo
Laboratório de Genética Molecular e de
Micro-organismos (LAGEM) – UNESPAR/Paranaguá
1 MATERIAIS
1.1 Microrganismos-teste: Isolados Leveduriformes Código Nome Espécie Manguezal 1L* A2C5(2) Candida parapsilosis Antropizado 2L A2C5(87) Meyerozyma carpophila Antropizado 3L A2M1 Debaryomyces hansenii Antropizado 4L A2M3(15) Debaryomyces hansenii Antropizado 5L A2M3(20) Candida tropicalis Antropizado 6L P1C5 Candida parapsilosis Preservado 7L P2M3(35) Meyerozyma carpophila Preservado 8L P2M3(42) Meyerozyma carpophila Preservado 9L P2M5(74) Meyerozyma guilliermondii Preservado 10L P2M3(74) Candida intermedia Preservado
- Pertencentes a coleção do Laboratório de Genética Molecular e de Microrganismos (LAGEM) da UNESPAR, e cadastrada no Sistema Nacional de Gestão do Patrimo ̂nio Genético e do Conhecimento Tradicional Associado – SisGenv. 1.2 Químicos:
- Agar bacteriológico - Peptona
- Dextrose - Tributirina
- Extrato de levedura
- Goma arábica
- Triptona 1.3 Meios de Cultura:
- Agar Sabouraud 4% Dextrose^1 (pH 6,7 ± 0,2)
- LB-Agar-Tributirina^2 (pH 6,7 ± 0,2) 1.4 Outros Materiais:
- Água destilada estéril
- Cabine de fluxo
- Estufa incubadora B.O.D
- Frasco Schott
- Palitos de dente esterilizados
- Papel filme (PVC)
- Placas de Petri 2 PROCEDIMENTOS 2.1 Preparação de isolados: (Adaptar o meio de cultura para o de preferência do seu tipo de micro-organismo). 1 Peptona (10g/L), Dextrose (20g/L), Extrato de Levedura (10g/L), Agar Bacteriológico (15g/L). 2 [Tópico 2.2] Triptona (10g/L), extrato de levedura (5g/L), Agar bacteriológico (13g/L), goma arábica (10g/L), Tributirina (10mL/L).
Figura 2 – As regiões translúcidas correspondem ao halo de hidrólise da tributirina (MOTA et al. , 2015). 3 PREPARO DE SOLUÇÕES: 3.1 Solução de Iodo (Lugol): 50ml Triturar com o auxílio de um gral e pistilo, 0,2% (0,1g) de Iodo metálico granulado e 5,2% (3,6g) de Iodeto de potássio e acrescentar 12,5ml de água destilada. Adicionar, por fim, álcool 99,5% até atingir o volume final de 50ml. 4 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS: LEE, J. G., PARK, D. R., CHOI, E. S., KIM, W. Y. Molecular cloning of genes for lipolytic enzymes of Aspergillus nidulans. Food Science and Biotechnology, v. 7, p. 300- 304,
MOTA, André Ferreira. Identificação de uma nova lipase a partir de clones de uma biblioteca metagenômica de solo contaminado com gordura animal. Dissertação (Mestrado)
- Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências – Bioquímica, 2015