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Eletroforese, Notas de estudo de Biotecnologia

É uma tecnica de separação baseada na migração das moléculas, numa solução em função de uma aplicação de um ponto elétrico....

Tipologia: Notas de estudo

2011

Compartilhado em 30/03/2011

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elaine-prado-4 🇧🇷

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 (^) É uma técnica de separação baseada na migração das moléculas carregadas, numa solução, em função de aplicação de um campo elétrico.  (^) Dependendo do suporte que utilizamos para a eletroforese e da natureza das macromoléculas, podemos separá-las pela carga ou pelo tamanho  É uma técnica laboratorial de separação de frações de proteínas, enzimas, DNA e RNA.

 (^) Separação de material orgânico que apresenta cargas elétricas definidas em pH específico

  • Cuba eletroforética;
  • Eletrodos (pólos positivos e negativos);
  • Solução tampão: pH específico
  • Suporte para eletroforese;
  • Amostra a ser investigada.

 Acetato de celulose  Gel de agarose  Gel de amido  Gel de poliacrilamida  Eletroforese capilar

 (^) Polissacarídeo (paredes celulares de algas marinhas)  Consistência na forma simplificada é considerada firme a partir de concentrações de 1%  Vantagens:

  • Facilidade de manuseio
  • Conservação ideal
  • Baixo custo operacional

Pólo - Pólo +

 (^) Smithies, 1955  (^) Análises de proteínas, enzimas, hemoglobinas.  (^) O tamanho do poro do gel é controlado pelo grau de pureza do amido;  (^) Vantagens:

  • Alto grau de definição analítica das frações separadas.  (^) Desvantagens:
  • Dificuldade na preparação do gel (tempo X material)
  • Tempo de migração excessiva (12 a 16 h)
  • Dificuldade na coloração das frações separadas

1-Desnaturante : com presenca de agenurantestes desna, separa e purifica fitas simples 2-Não desnaturante : separa e purifica fitas duplas, sem presenca de agentes desnaturantes