Pré-visualização parcial do texto
Baixe Biologia molecular completo e outras Resumos em PDF para Biologia molecular, somente na Docsity!
O Estrutura, erqanigaçdo e fungõe de DNA, ANA é Reteiras. « Interaçõe entre DNA ANA e bigesintese de proteínas, «deidos nucdeices: constrái 9 material genérico À soido; desatento ve núcleo; DNA « RNA; |, armazenam mransmitem e usam o infermogõe genéticos L esmpastes por Merômeres - nuceetídees Fosfato, Bases mitreggnados: Nucltostdes + Aderino, A=T . o. - Quonina. CEG wa « Cilesino. púricos: Ae G [ Base nitrogenada | Esto) O H-Tmino pirimígicos: T,C eu « ANA: ribose ; A U,G.C; CahoOs; fito simples «DNA: desexiritose ; A T,Ge C; CoHoO4; Gita duplo. “hereditariedade: passo. infermações detalhadas oe descendentes. durome, ou Fegreduçãe 5. --s,B 4 dent do núcleo do.célula ATGGICTE em Esto duplo. em espiral eu hélice TACCAGAG | —» complementor “» é uma mocromeléculo, GAGACCAT invertida “us fixo: agóene + fosfois 553 = Sentido do. vidoy ; comtegods veqplivamente AGE T+C nuclear: forma, 9 DNA e e imitscendrial É nôs cremassêmics admite G quedas de leitura — enotudol. qunático de alguna, víros — egostidui 6 mibessems ; ERNA, MANA 4 Auaçõeo Fequloiórios — mentaguiss ente DNA e Nbessomes ; Iongere 9 cédigo genético Lo fito. simples DA ad Lo mANA Inte qrnólico. capiados de DNA pl & citoplasma, [o RNA decsdifico mensoqem. qenético, ne MANA Lo oRNA: morta. proteínas des Ominsásides ne nbessem , EBirora 2º: se dibrom predugindo 4 farmas (e + funções ) Lo esndua o ergonigoda. e complexa, » dsbra. e empocsto hélices de RNA O -» Peplicaçõe de DNA: fog cópia. do. próprio. imeléeulo,, criados uma nexo. cg] que se + e prohizeras | favorecida, pla. dita, duplos e boses complementares. ; akvidade fevisodera. 3-5" | é semicemservalivos , tem vários engimas. ;é ti ditecionol O - Eeroyilho de replicaçõe - groe. eeerte quitonsiçõe do NA qusental Eita. dupla. q] novas giras O - DNA palimmerase. preciso, de um primer poreoda 09 melde que será. cspiade ; tem adividode fessodero. O - fito descontínua e que precisa de qe de AMA pl síntese da, dita, descantínvay ( Arogmentes de ohasaks) O - Arogmentes de dhasalh sob unidos pelo ONA liquse, (selo 08 quebros) emutogões «alterações ne moteriol genético ; será Ironsmilido: ql a, próximas qesaçõe celular e metilação : qurante que a. dita, a. ses reparado é a Sita Silho ENgjmoa muts MutL Mot H exsnucirose DNA pol d reranece gareoment (, fesimhece a. Cela ft Caegçoda um Comes; & etroda lomeioda — vbméliido. aceda da qfiho qua do Hecno RUA goinerase usa d dna tome fito. ide (miemenfont “as Doses =» form nocieídeoo » enot +aminocil se conectom a femnhecem é e a a Código genético ; sítioP de mítio 4 A Cinol Ses 1 09 ave lipo 0» onticadem ANA à a Aaguço” o St Ç Seoire em cima de iNAm - Ur temiém 04 informação, — Y DNA ANA PrOLeÍNAaS RJ E) NO feflicoços traduçõe : Hechs de TNA que esdigico uma prsteínoy 4 porte prometero.: indico, sequência: de umu gene que ee lgo. q um engisnoy de Hans crigõe bgorte final: indica e término doy Honseriçõe de RNA e a dissociação doy RNA primerase. O À sepososõo das Lito de DNA erprte polos Quebra. days liquções & hidregênio O RNA primesase recenhece a qene prematee (início) O cél retiro, inicons e religo éens > vô para, a, Fraduçõo Co esdigieade ro, U sequência que codifica umas proteína. O Síntese de Fl! gelo ANA polimerase —» +ranseriçõe |, hgoção da. RNA polimerase ne prometer |, separação ( desnoduraçõe) da; duplo. hélice pela. helicase. b recgnhe cimento * iniciação + alemqa mento - Jerminaçoe | nistenos inicialmente ce desligom e depsio se associam nevamente Trad vçdo Ls esgens viam amicpaiidos Decore no eibessome jo es! precisa. do esdigo genético embutido de alguma. Serma À, amineonides precisam ser alivades : orepiados com o ANA E ( especígica) L engimos que liga 8 amifecedo na qonto 3-04 = amingocil ANAL sintetose Conns) S 20 + tipos, 8 regnhecimento do cxdigo genchico esto” dentre dos aaRS « nes BNA & L, RNA É umo. mekéculo odaptadero; — Hansporta, metienino, 6 q entava ro lecoy do FibOsseme Csihep) Às tem um amicgm LUAC) que se ligo cs códen da ANA m (AUG) o artieádon. complementor Ls Iraduçõe vai gesrtendo quonde um fibossems se desleco, sebre umo. cadeio. de ANAm, -» codes polipoptídicas UAG: esdery de parada. Cras é eeupoch pot umo. prajerno. Cfotor de libe cocos) e v5 porticipontes de processo Se separam L, proteina. é $ormado. gelo: info do. sequências de csdens do ANA Mm b comjumib de vários nbessomes que Modugem. o mesmo RNAm, = POlRRIgESSOMO Práticas de bigme) R cemtaminoção Crua, Sopergície »Ventilaçõe ,teoqentes , cabelo e produto de omplf icaçós Purificação ds DNA: Sepora DNA poe restos celulares e dos proteínos (DNases >degrado, DNA) separação, idenhigieoção « pursgicoção do meléeulas de dia, eletroforese emu qgl de Oqprose- Iriqraçõo das particulas com aplicação de uma. ddp + mekeulos mensrea. migtom. + cópias) PCR: amplficoçõo de froqmentes de INA específicos i dito mede, Leliganueleetídemo e DNA qrlimerase, engimas de manipulação de dna;: enginas Doctesianas que cotosisom reações esgecíficos nos Molde de DNA ; in vio nuckoses e Tibonvclegses: elivom tg fenfodiésier a imgatonk q) ONA recambinonie liqose: estoisa a qrrmação de Ng Sesfadiésieo ente 3H 4 SPOM one eondenkement melée de DNA Sia duplo, fembre BU Odhitibna. Qiupos gossote e folimerose. entalisa & síntese de meléc. de um, DNA à, portir de om molde joça é e Medigicaderas: cotaliso. reações que Mediicom mele: de DMA pot remação Gu odiçõe de Qrupos Quimicos específicos o Tbrrisomerases: madigica. O comSetmaçõão de DNA cifcular pelo. indução ou remeçõo dê Soperenrelomento: PolimerSisme de comprimento de Moqmente de restriçõe (pri): produto PCR ompligicode + engimo. de restriçõe 1» compara. + de tamanho mes Stogmentes de TNA elenogem, metecular: difusos de melée. de DNA idênticos. sinhtadug & qpre dentro qe cél bocterionas e iselodas em csiônias 4 formas uma. quimera, So melée de DNA fecombinonte amúlise de DNA é BNA em totring: Ibridigoção dos melée de Ge. nucléicas -» locoligor pesiçõe de um Qene. senvenciomenho de doa: pré -Seguisite E! análise detalhada de um gene Centreke do, expressós gênica N DNA + proteinas - cromatina. À, netersesomodina,: condensada, e inotiva. 15 egesemokinos: +uendunaodo « abivos b, expresso de um. gene ecoste pelo criação de um, ANA maduro bs q, unpressio de uma, proteina, emOcte figa uma, proteína. Sumeiemol, 15 quima, é cempie comelonte Lo estímulos externos podem. afetar 8 Honecriptomo, proleomo. e aetobelgma |, expressão qênico, = interage entre genoma, 4 ambiente Sé Fonte do. requlaçõe eeerte na esirulura, do. eremalinay Ly melilação do-DNA e mesifiaçõo de histonoa oslicima, Qrupo Met, impede my Osseciaçõo de fatores Aonscricianais pode gesrrer em adeninos e ciesinas amnsuioção q proteínas (MDB) recria, outro reteínas - crematino. comparado. Se Micro PNA : nõo é codificonte complementos as alva gilenciomenha de ANA e tequlação p$s-fronscricianal. clvogem do mANA » desestobilização > diminuição da eficiência do Yrosluçõe Aurçdo : desenvolvimento e homesstase (prolizerçõo , apoptose e diferenciação) Genes: e constitutivo: Sronserde constantemente tecidos expressom = qqnes; O Yeuselrepng: monvlençõo búsica, do célula » muito expresso pede expresso au Teprímir 4 qenes em + siluagões, o facultakivo: ttonscrile quonda necessário O indugível: cespenswo as variações ambientais 3 Tronseriplemm: Tedaro qr ereléo, de ANA env um. Iseol > e acorda condições gotelógeos e Sisiifgeos. b secbtém por sequenciamento db enriquecimento 9) ANA vo ribessemais 3 Precescoses cemputacianalmente breods — quonhsicaçõo dy expressós 1 expresedo diferencial & fesomentos, do, expresedo qênicor Ly Per , mierrarroy , ANA s NES, ExPRESSÕO de RNA E DNA + exITogorese em (pl o ebgetive. elemogem, doqníiico , cequencionnenhe e arg geneticoment medigicods. & YWoximigor o. recuperocoe e Quolidode de 7/1” ;temeNes inibideres e mucleases. o Remhes: bispoia, kiminos histolágicas e moderia) poraginado & detergente: lise celulas | engjmas: precipitação de preeinas É dlesito precipitado de DNA » extração ergânicos -rengentes » | Qual método funciona melhor para 4, Jompos de lise eelulos : detergente nóê -jônicos: EEE temeve material prejeico 4 ema: quelonte de cótiona divalentes — Fen elarofórmio. 4 etono |: preciprto. de DNA remeve proteinas, NonidetP 40 É insrqânico: protemose th e Going uk b proteinas sob femevidas com + Cnacta Ly altera mebilidode de DNA “4 méloga de odsorçõo : À de mueeieos se lgom, ou uma, superçieie. ce sílica, (que é lavada); Solução cem UNA é fecuperodo. etapos, do. axtraçõe (OD Cekto de amegitas - Gongue , buggy cooa, sera etc (B tompõo de fico: exit e conteúdo do DA e usor detergente ,membrona. fica pesmegivel semper membrana. celular Frereinose K (3) preleose Copeismal): imputega. emu mo. preporoção de de. nycleicos: projeína.s —> pomares o. porificoçõo da DNA fera istmo Ih (6) adição de sal. temeve proteinos associodos os dna; quebro uotede e mesbtono pl liberor & DNA cant (na é inselúve | em cet) (E) odicõo de dlcesl: csles) aglodo q) precipitar ; pemove sol solúvel a desoestera engimos que pedem quebior DNA () lemperotura) 4 etanel induz uma mudonça. estrutural Hronsitória, — oqpegaçõs e precipitoçõo PerdrodandE :qlo Dave subia em algum esvene; sem quntorminonte e engunos degrodames o» ANA: 1, dante: depende dor cél ,testdo, Ombiente x dsenços L, extração: iselor d ANA, remover subsi inibideros 4 inabivor ANAses endgpnos, Es erslérula, nb estável Ly Yreeianalh de guanidina. -Penalelorapáótimico - 4 comu Semelhanços A BS & Utom cubel. recivos( foral e cloro Górmis) YA Centrigugação € esseneiol Ni eta € vsatr pl lovor é qprecipitoss « ebtes DNA gy ANA gurigicode extracio de ácidos nuckices d extrair DNA rol de conque trad do interpretar & podrés pos eletroforese. fengentes: «Tris: DNA sensivel ; terna, membrona. permedvel + EJTA: quelonte que bloqueia O alividode da DNAase *Nofp: cria ligpção Fônico. cem corgoa O de DNA ; profege do desnoduroçõe « less) obselul: precipito. DMA -Gel de oqrose: » tomanhg vosia gelo CI ; paras ceony tonal ns qel ; produz moncha, no DNA b 4€3 | ooros | iegridode des paços : pode altetor uletrofarese e Londos intesprejoçõe de fesultodes | pl amôlise qUNA a q! onsílise de resultodes de PCR qel de tem qualidode bordos Simas « cloros ; sem estigo de euro DNA; bonda, Quirexplicatho. ;dimeres de inicioderes minimes Amplificaçõe de DNA fer Pad sequência jnica « am plificaçõe in vitto de DNA ; rápido, Sensível x verso * Qro quantidode de DMA eusiciente e! maniguloçõe de vukos ondlises » elenogum: de qumes à Invtogênese ; conlnminação ; dioqnéstico ; quntificor diferencos na, expressos de qumes. - qplimerase: sintetiza DNA na pelos adição de invckeoicdeos q uxiemidode 304 ; precisos de um primer e molde A omesiação espeeiçico PCR: imita, preso de seplicaçãe de DNA b qumudos q Quambidade de uma. sequência, de DNA de intetesse 4 exescimenhto exponencial 4º tempesadura alienado. ; + wensibilidode e especificidode ; rúpido e qouco madertal qendhics Too, DNA polimeçose: Sinhetigo DNA ; aditigna, odenina, ne Sinal do duplicoçõe do umouêncio de DINA Ly sem atividade exenudensica. ; eta e odiciona. um. À a + nas sequências. compenendes: DNA melde = extrards das amstito. — vóties tomones ; LONA ; complexo Primer. pondo de início da feplicação -» em gates para cada, qn a sem complementariedoda. ts GuiC na itima. qusição 3': meinoço, espeeigicidode e 4 uficêncio; na, teoção Uevito, repetições de um mesms eligpnucienides besta, Nairpins: nos nibridigo nO. sequência. alvo Levi, auledimerigação : À malic de inieiader que se ligoom. por bases cemplementotes LY meMing : qedem, areias alves similoses e QmplSicar produdos À especíçicos b4 rrelhing:pretoobilidode ce anelamerda « predudo y Primer 3: esenthe 3 melhaçes qures -» exigente qenefunner: emmerir eligos do primer 3 = quuco exigenhe NCBL: eonferio se o sequência à omplgico gds qene Cremos PAA Monipuação De ÁtiDos Neleices, ClIvAGem de DNA Cem emonueleases de restriçõe destasmenta. da. emenhario. qenttico. tnanipulogão in viro de melécdas de DNA gu RNA ergjmos bociesianoso que cololisam teações esqecígias nas meÉeios de DNA ENZIMAS: À melenses, ribenvoleases, fignravo, pelimetases, medificaderos e teprisemesases esmas de restrição ou endenuleases: enrtom o fito. dupla de. DHA em Iocoto especigiems-sítico de restrição Lesauros melecutaçes: corkes no, cequência. específica. de, potes de base. que fecenheçe. Lcrtom dentro da meécula: endemuelence Lenembiada. mos to e veados para, se defender de vírus ementa decote é um polndrams E GRATICS ou Segjência, de boces de uma. fla é = o. complementar J CTTAAG.D À copio ONA ted. veg que encemitom uma. sequêncio. curta específica. (4,600 E doses) assgeáaicomenccimado Tipo À : corte vorióvel, peciso de ATP, Gsi de reconhecimento doca, | nomeados: | Prime - QÊnei imeiro, leisa qprers mi agr Sete te equ Segunda. e Jerceisa, Jetta: espécie. TREs tirar tea > . preciso de AP As eqqintes: linhogem e o erdem de desesbesto, (ssftue I20B-Sa-Aneod precisa de 28 nie, “a Ivotée *freme a mente” ro Pa de ideação 1 Egor EPemgjmo, de resisição iselodo do. Escherichia. cob Hindi emma de restuçõo iseloda da Hoemephilus influengae et: 1engjrna. de restrição iseloda da Fevidereio. elvarty CSesSivo) AR ante / adesiva E - Em EE E: Cega Lucsrtes esenlenades Ly gemas osesivas [egesivas & fita. simples À geasgramis de INA tom exltemidodes Odesivos esmplementores padem ser combinados quro. fstmos nevos Melér — erioçõo e monipulação de Seguêncios de DNA Ge diferentes fontes abrupto luego beem penta, ; ÓMl gota experimente» de clenogem de DNA |, gate ser unida ay quolquer evite froqmente de DHA cam extemidode obropõas Sis EcoRl: Si%are . E) Neconisme de açõe: IR endenociense de testniçõo yorie q esmprimente dr DNA varsedur: tecanhecime: core, L liga-se à maléculo, de DNA go cecanhecer qy Seguêncio, especifico. A = necimene — Leg um esMe em enda uma. das codeios de agúcor fosçaio PDoctérios Aa sit de mmeblocão que gretege. seo DNA vi oqjuponde hos mmeilados = sem elvoggm * Bibl de cesttiçõo e modificação Pengimos do ipod: quindternos (4,6,8 boss) >esanhecem o seg no complementoredode ex: Apa ERCA Não corta! Ape» dote Amdenveleases. Lipor: otividode de sesiriçõo e madificOÇÕe ; queciso. de ATP are o Nãocorta! elivom em leais alentários q. mais de 1000 pb de distância. N3 =" qm 20% de eficiência de corte Lipo. + COML engima, , Cecanhece e cias 6 DNA ns mesma Sítio * um 100% de eficiência . de corte endenutkase e metilose :clivom 08 seg nO ausência. de ATP Lipo d Bubunidodes : tesirigão e melingos e cecanhecimente ; «precisa de ATP IR clivam 20-30 pores de boses depeis do sikia de cecenhecimente | + engmos de resiriçõo o Mesma, segpêmia. de recenhecimente Lgerem vos cendições Simas de reoçõo endênveleose pede clivor DNA de fita dupla. , Simples go ANA vitais para. & repare dy DNA —tecenhece e cliva 8 DNA donificodo egm precigob evita. elnogem desnecessátia € dones odhcismais ; qedem geffer um qerioda de altase antes de soa ação lempo q! reconhecer Oliva um segmento DNA nº Meio, fesulta em eligoruclestídess pedem der função de fenswa : impedir qu entroda. de alguns pabógenes ANP ÉS : À ussmpnsiego de tompôb : forca. jônico. usem prineiçal ; manter ph À tempesotura, Ge incubação : moisria JC Isctqumos É Clivom DNA metodo CRISPR * Pepetigões pondiêmicos curtos e feguloiment. ineresgacodos ; sesultas em certes de DuA Leoa. qfonde.;mulHifuneieno), & domínios nucleases ; Come um sist mund légies Lsist que bockros q! ve defender de Vitus Crocteró pages) À.csgo. dr ONA invasee é Inserido no DNA do. Docktria, 2. espaçadas 56 Honserites no. fesma. de CrANAs 3. CP ANA € inserido num complexo 4. complex atoco p DNA invaser, e cas esrta esse DNA Lost específico, Teglicdivel, qualguer seqios qenêmica e Hpe de célula edição qeoômica Leatem-casa é preciso e eficeme ; qpiesevpoções élicas É necode de qpres ; sikncomente de genes defeituosas Liam ento seg de DHA exógeno. Aplicaçõe: Lagfeneóei, biscombustível, mesquiles , anemia foleifesme , tOmundemçps Terapia. gênica, Sequeneiamento de gunema, humano ; iNesgeris na constituição qmética FONA recsmbinonte- criada arhfiuolmene deeças qenétcoS , odquiridas , Ceario e infecçoés virais = resolução de predlemas ' if em, um DNA Secombinonk, genes sodies ql Svbsritur, monipolar, qeres inahives eu Gisfuncienaio us da ONA came agente farmocêuties q! Yatomento de drengos Crest = eopecificos e funcionais, p) suteliuiçõo de genes defeituasos O mini sab q elenciar um gere defeituoso Estralécios de aplicação O ex vivo: retirado de cg] da tecido desezado hstidos in Nitro ,mpdigicodos qpnelicomenk e devilvidos wp/g eQpnismo Oin vive: velores eficientes Lncendos ditelomerde no aigmismo e cortega pl tecido alves es gumes setema trestperades Vetores pora terapias qênicos e bose:: inreduçõe de ques em céllos « Eriroda de DNA pure - fara > dificulta. alterações e Fonsfarmações esnetontes e qsecipo. de um cortegoder q) focitar o entrado. da DNA ros células vivos e Neem: corsego. eoslétulos ge DNA qara, 0. cólula ds poriente e melhor vetor: es] e tecido alvo; 49, lempo de expressão, opheoçõo (im viva ou ex vivo! e, difieuldode de nonipuloção e produção o doses: nãa viois ( plosmídess) e vitois “ MASuíneo S: Lenênens de Da simples, eficoges pl expressos de genes >incesi um quae qor DNA tecombinonte Lego o meniiana eslular (onsgpe eléicics) Logica t quantidade de plasmídes tersiens hmibadas (af de rotsadasgir em Grp de dif tel acessa) Lire que fprmom redes q prendem qene e Seltom suo. cotga. quando entiço. no célula. bectenlas de ipídess com DNA: Se fondemm com a membrana dos celdas Eletroporação Microinjeção Plasmídeos Lipossomas Simples, eficiente, mais facilidade de regeneração da célula, permite a entrada de DNA maior que 5 kb. Transferência de DNA precisa, eficiente e pode usar grandes quantidades de DNA. Simples, não tóxico ou imunogênico, carrega DNA de 1-250 kb. Simples de ser produzido, pode ser feito para carregar grandes quantidades de DNA, boa permeabilidade celular, não imunogênico. Técnicas Vantagens Desvantagens Biobalística Simples, rápido, permite uso de Dano celular, pouco (bombardeio de grandes sequências de DNA específico e tem baixa partículas) (ex.: plasmídeos). eficiência. Dificuldade de execução da técnica. Cara e alto nível de dificuldade em realizar a técnica. Baixa transformação, expressão gênica transitória, dificuldade de entrar nas células. Baixa transformação, expressão transitória. “nexpres vitais: re 81 e srkcodugio malerial genético Libera átido nudléico na cél hospedeira. L inetivação da suo. qulegenicidade, vidência. e replicação — deleção e subsiituiçõe desses gpres pela Jeropêutics Oestiiusctetrnío que pode infectar cel que nôb se dividem À odoneviros, rebsenírus au odenavitus-oscaciados Lcempser pres da potegeniesdode e proiteraçõe viral pdemondo O necessário pl wa s0o, emulhiplicação e Igetção de 1ogr Ne gene para dentro da célula. 1.O virus que será usado coma 2.0 gene que o paciente 4. Dentro do núcleo celular, vetar é alterado geneticamente precisa é inserido dentro o novo gene se integra ao para se tornar inofensivo do vetor viral DNA da célula hospedeira recesso da. tesapia qênico, O seleção da que de inhesecse O seleçõe de plosmídes O seleção da ver O steção de méledo O spleçõo da técnica métedos de enttegpr do qene: fisicos: micreinseçõe ; imseçõo diselo, e eleiteperocho químice: gor teceçter; invilços dielógiea: seltenítus ,oderovitus e astenôvítus osseciado 
