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Este documento contém instruções detalhadas sobre como realizar um exame de colesterol usando calibradores proteicos da série calibra da labtest. O documento abrange informações sobre a amostra, os intervalos de medida, o uso de diferentes calibradores e o controle de qualidade.
Tipologia: Notas de aula
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Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Informações Gerais
O número de determinações (brancos, calibradores e amostras) corresponde ao volume total de reagentes dividido pelo volume de reagente utilizado em um teste.
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
140-1/100 100 140-1/250 250
Edição: 02/06/
Reagente
Utilizar o Reagente de Trabalho. Ver modo de preparo nas Instruções de Uso do produto.
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio: Branco Teste Calibrador Amostra --- 0,02 mL --- Calibrador --- --- 0,02 mL Reagente Trabalho 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Misturar e incubar em banho-maria a 37°C durante 5 minutos. Determinar as absorbâncias do teste e calibrador acertando o zero com o branco. A cor é estável por 30 minutos.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ Usar o Padrão (Ref. 140.3) ou calibrador pro- téico da série Calibra H da Labtest.
# Parâmetro definido pelo operador.
Linearidade
Limite de diluição: 20 mg/dL
UNID. mg/dL
DECIMAIS 1
LIM LIN. MIN 0000
LIM LIN MAX 20.
ABS REAT MIN #
ABS REAT MAX #
ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX #
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
108-4/30 120 108-2/100 200
Revisão: 14/12/
Reagente
Utilizar o Reagente de Trabalho. Ver modo de preparo nas Instruções de Uso do produto.
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio: Teste Reagente de Trabalho 1,0 mL Amostra 0,1 mL
Misturar e imediatamente iniciar a medição.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ - Usar calibrador protéico da série Calibra H da Labtest. O beneficio obtido realizando a calibração é a minimização do erro sistemático que pode ser provocado pelo sistema de medição (lâmpada, fil- tros, luz espúria e pipetadores). Para que a cali- bração seja adequada, é necessário utilizar o cali- brador sugerido. Caso se decida pela utilização do fator teórico (1746) , os erros não serão minimizados conforme mencionado acima.
Para calibração, dosar o material calibrador em triplicata, conforme procedimento utilizado pe- lo laboratório (a diferença entre as replicatas não devem ser maiores que 5%). Em seguida calcular a média dos resultados obtidos e utilizar a equação abaixo para obter o fator corrigido:
Fator utilizado Atividadeencontrada
Atividadedocalibrador Fator corrigido = ×
Introduzir na programação do equipamento o valor do Fator corrigido em substituição ao Fator utili- zado para a determinação da atividade enzimática no material calibrador.
# Parâmetro definido pelo operador.
Linearidade
Limite de diluição: 400 U/L
No. INTERVALOS 3
∆A/MIN. 0.
% LIM LIN 10
DIR.. DECR
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 2.
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Controle da Qualidade Sugere-se utilizar as preparações estabili- zadas da linha Qualitrol - Labtest para con- trole interno da qualidade.
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
108-4/30 120 108-2/100 200
Revisão: 14/12/
Reagente
Transferir 0,300 mL do Reagente 3 para um frasco do Reagente 1 (24 mL) e homogeneizar suave- mente. Estável 1 dia entre 15 – 25 °C e 21 dias entre 2 – 8 °C. Para preparar menor volume do Reagente de Tra- balho misturar 1 volume do Reagente 1 com 80 volumes do Reagente 3.
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio: Teste Reagente 1 + Reagente 3 0,800 mL Amostra 0,100 mL
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 ±
0,2 °C por 5 minutos. Adicionar 0,200 mL do Reagente 2, homogenei- zar e imediatamente iniciar a medição.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ - Usar calibrador protéico da série Calibra H da Labtest. O beneficio obtido realizando a calibração é a minimização do erro sistemático que pode ser provocado pelo sistema de medição (lâmpada, fil- tros, luz espúria e pipetadores). Para que a cali- bração seja adequada, é necessário utilizar o cali- brador sugerido. Caso se decida pela utilização do fator teórico (1746) , os erros não serão minimizados conforme mencionado acima.
Para calibração, dosar o material calibrador em triplicata, conforme procedimento utilizado pe- lo laboratório (a diferença entre as replicatas não devem ser maiores que 5%). Em seguida calcular a média dos resultados obtidos e utilizar a equação abaixo para obter o fator corrigido:
Fator utilizado Atividadeencontrada
Atividadedocalibrador Fator corrigido = ×
Introduzir na programação do equipamento o valor do Fator corrigido em substituição ao Fator utili- zado para a determinação da atividade enzimática no material calibrador.
No. INTERVALOS 3
∆A/MIN. 0.
% LIM LIN 10
DIR.. DECR
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 2.
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
# Parâmetro definido pelo operador.
Controle da Qualidade Sugere-se utilizar as preparações estabili- zadas da linha Qualitrol - Labtest para con- trole interno da qualidade.
Linearidade Limite de diluição: 400 U/L
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
142-2/30 60
Edição: 29/01/
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio:
Teste Substrato 1,0 mL Amostra 0,02 mL
Misturar e imediatamente iniciar a medição.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ - Usar calibrador protéico da série Calibra H da Labtest. O beneficio obtido realizando a calibração é a minimização do erro sistemático que pode ser provocado pelo sistema de medição (lâmpada, fil- tros, luz espúria e pipetadores). Para que a cali- bração seja adequada, é necessário utilizar o cali- brador sugerido. Caso se decida pela utilização do fator teórico (6829) , os erros não serão minimizados conforme mencionado acima.
Para calibração, dosar o material calibrador em triplicata, conforme procedimento utilizado pe- lo laboratório (a diferença entre as replicatas não devem ser maiores que 5%). Em seguida calcular a média dos resultados obtidos e utilizar a equação abaixo para obter o fator corrigido:
Fator utilizado Atividadeencontrada
Fator corrigido = Atividadedocalibrador ×
Introduzir na programação do equipamento o valor do Fator corrigido em substituição ao Fator utili- zado para a determinação da atividade enzimática no material calibrador.
Linearidade
Limite de diluição: 1700 U/L
No. INTERVALOS 2
∆A/MIN. 0.
% LIM LIN 10
DIR.. INCR
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 0.
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
109-4/30 120 109-2/100 200
Revisão: 14/12/
Reagente
Utilizar o Reagente de Trabalho. Ver modo de preparo nas Instruções de Uso do produto.
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio: Teste Reagente de Trabalho 1,0 mL Amostra 0,1 mL
Misturar e imediatamente iniciar a medição.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ - Usar calibrador protéico da série Calibra H da Labtest. O beneficio obtido realizando a calibração é a minimização do erro sistemático que pode ser provocado pelo sistema de medição (lâmpada, fil- tros, luz espúria e pipetadores). Para que a cali- bração seja adequada, é necessário utilizar o cali- brador sugerido. Caso se decida pela utilização do fator teórico (1746) , os erros não serão minimizados conforme mencionado acima.
Para calibração, dosar o material calibrador em triplicata, conforme procedimento utilizado pe- lo laboratório (a diferença entre as replicatas não devem ser maiores que 5%). Em seguida calcular a média dos resultados obtidos e utilizar a equação abaixo para obter o fator corrigido:
Fator utilizado Atividadeencontrada
Atividadedocalibrador Fator corrigido = ×
Introduzir na programação do equipamento o valor do Fator corrigido em substituição ao Fator utili- zado para a determinação da atividade enzimática no material calibrador.
Linearidade
Limite de diluição: 400 U/L
No. INTERVALOS 3
∆A/MIN. 0.
% LIM LIN 10
DIR.. DECR
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 2.
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Controle da Qualidade Sugere-se utilizar as preparações estabili- zadas da linha Qualitrol - Labtest para con- trole interno da qualidade.
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
31 250
Revisão: 17/01/
Preparo do Diazo Reagente
Adicionar 0,01 mL de Nitrito de Sódio (no^ 3) a 0, mL do Ácido Sulfanílico (n° 2). Misturar e usar no dia da preparação.
Procedimento
Usar o Padrão de Bilirrubina Ref. 32 ou calibrador da série Calibra – Labtest para a calibração. En- saiar o padrão ou calibrador em triplicata.
Calibração Calibrador BrancoC Acelerador (n° 1) 1,0 mL 1,0 mL Ac. Sulfanílico (n° 2) ---^ 0,1 mL Diazo Reagente 0,1 mL --- Calibrador 0,05 mL 0,05 mL
Misturar, esperar 5 minutos e efetuar a medida do BrancoC e do Calibrador.
Ensaio Amostra BrancoA Água deionizada 1,0 mL 1,0 mL Ac. Sulfanílico (n° 2) ---^ 0,1 mL Diazo Reagente 0,1 mL --- Amostra 0,05 mL 0,05 mL
Misturar, esperar 5 minutos e efetuar a medida do BrancoA e do Teste.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ Usar o Padrão (Ref. 32) ou calibrador protéico da série Calibra H da Labtest.
# Parâmetro definido pelo operador.
Linearidade
Limite de diluição: 25 mg/dL
UNID. mg/dL
DECIMAIS 2
LIM LIN. MIN 0000
LIM LIN MAX 25
ABS REAT MIN 0000
ABS REAT MAX 0.
ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX #
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
31 250
Revisão: 17/01/
Preparo do Diazo Reagente
Adicionar 0,01 mL de Nitrito de Sódio (no^ 3) a 0,
mL do Ácido Sulfanílico (n° 2). Misturar e usar no dia da preparação.
Procedimento
Usar o Padrão de Bilirrubina Ref. 32 ou calibrador da série Calibra – Labtest para a calibração. En- saiar o padrão ou calibrador em triplicata.
Calibração Calibrador BrancoC Acelerador (n° 1) 1,0 mL^ 1,0 mL Ac. Sulfanílico (n° 2) --- 0,1 mL Diazo Reagente 0,1 mL --- Calibrador 0,05 mL 0,05 mL
Misturar, esperar 5 minutos e efetuar a medida do BrancoP e do Padrão.
Ensaio Amostra BrancoA Acelerador (n° 1) 1,0 mL 1,0 mL Ac. Sulfanílico (n° 2) --- 0,1 mL Diazo Reagente 0,1 mL --- Amostra 0,05 mL 0,05 mL
Misturar, esperar 5 minutos e efetuar a medida do BrancoA e do Teste.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ Usar o Padrão (Ref. 32) ou calibrador protéico da série Calibra H da Labtest.
# Parâmetro definido pelo operador.
Linearidade
Limite de diluição: 25 mg/dL
UNID. mg/dL
DECIMAIS 2
LIM LIN. MIN 0000
LIM LIN MAX 25
ABS REAT MIN 0000
ABS REAT MAX 0.
ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX #
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
95-2/50 100
Revisão: 14/12/
Este procedimento não minimiza a interferên- cia causada pela presença de pequenas quan- tidades de cálcio nos diferentes tubos.
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio: Branco Teste Calibrador Amostra --- 0,01 mL --- Calibrador --- --- 0,01 mL Reagente Trabalho 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Misturar e efetuar a medição dentro de 10 minutos.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ Usar o Padrão (Ref. 95.2) ou calibrador pro- téico da série Calibra H da Labtest.
# Parâmetro definido pelo operador.
Linearidade
Limite de diluição: 17 mg/dL
UNID. mg/dL
DECIMAIS 2
LIM LIN. MIN 0000
LIM LIN MAX 17.
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 1.
ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX #
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
90-2/60 60
Revisão: 14/12/
Reagente Utilizar o Reagente de Trabalho. Ver modo de preparo nas Instruções de Uso do produto.
Procedimento
O procedimento a seguir minimiza a interferência causada pela presença de pequenas quantidades de cálcio nos diferentes tubos. Apesar de utilizar- mos branco da amostra, as interferências causa- das por turvação, lipemia e icterícia não serão evi- tadas.
Em tubo pipetar, 2,0 mL do Reagente de Trabalho. Agitar e ler o branco. Para o mesmo tubo contendo o restante do Rea-
gente de Uso pipetar 20 μL da amostra (soro, plasma, calibrador). Misturar e ler o teste.
É fundamental que o Bio 2000 / 200 esteja aspi- rando o volume correto. Calibrar frequente- mente o volume de aspiração.
Correção da interferência causada por turva- ção, lipemia e icterícia discretas.
Trabalho, 20 μL de Hemstab (Ref. 30), misturar e ler o branco. Para o mesmo tubo contendo o restante da mistu-
ra, pipetar 20 μL da amostra (soro ou plasma). Misturar e ler teste. Resultado = R Resultado final = R1 (^) − R
Controle da Qualidade Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ Usar o Padrão (Ref. 90.3) ou calibrador pro- téico da série Calibra H da Labtest.
# Parâmetro definido pelo operador.
UNID. mg/dL
DECIMAIS 1
LIM LIN. MIN 0000
LIM LIN MAX 16
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 0.
ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX #
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Linearidade Limite de diluição: 16 mg/dL
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
CAPACIDADE LIGAÇÃO FERRO
Ref. Determinações
41-40 40
Revisão: 14/12/
Procedimento
Calibração Padrão BrancoP Água deionizada 1,0 mL 1,0 mL Padrão(n° 2) 0,25 mL --- Ferrozine(n° 3) 0,025 mL 0,025 mL
Misturar, incubar por 10 minutos a 37 °C e efetuar a medida do BrancoP e do Padrão.
Ensaio Teste BrancoA Tampão (n° 1) 0,75 mL 0,75 mL Soro(sem hemólise) 0,25 mL 0,25 mL Padrão(n° 2) 0,25 mL^ 0,25 mL
Misturar, incubar por 10 minutos a 37 °C
Ferrozine(n° 3) 0,025 mL^ ---
Misturar, incubar por 10 minutos a 37 °C e efetuar a medida do BrancoA e do Teste.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
# Parâmetro definido pelo operador.
Cálculo CLLF
ATENÇÃO: Para se obter o resultado da CLLF é necessário subtrair de 500 o valor fornecido pelo aparelho. CLLF( μ g/dL) = 500 (^) − Valor fornecido
Linearidade
Limite de diluição: 501 μg/dL
UNID. (^) μg/dL
DECIMAIS 0 LIM LIN. MIN 0000
LIM LIN MAX 501 ABS REAT MIN 0. ABS REAT MAX 0. ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX # VR/VN MIN ___ VR/VN MAX ___
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
118-2/30 60
Revisão: 14/12/
Reagente
Utilizar o Reagente de Trabalho. Ver modo de preparo nas Instruções de Uso do produto.
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio: Teste Reagente de Trabalho 1,0 mL Amostra, Calibrador 0,050 mL
Misturar e imediatamente iniciar a medição.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ - Usar calibrador Ref. 118.3. O beneficio obtido realizando a calibração é a minimização do erro sistemático que pode ser provocado pelo sistema de medição (lâmpada, filtros, luz espúria e pipeta- dores). Para que a calibração seja adequada, é necessário utilizar o calibrador sugerido. Caso se decida pela utilização do fator teórico (1333) , os erros não serão minimizados conforme mencionado acima.
# Parâmetro definido pelo operador.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar a preparação estabilizada Quali- trol CK - Labtest para controle interno da qualida- de.
Cinética Tempo Fixo
O modelo proposto utiliza o modo de reação Tem- po Fixo (T.F) com objetivo de minimizar erros pro- vocados por arredondamentos. A reação é monito- rada durante 300 segundos e a variação da ab- sorbancia durante o intervalo é multiplicada pelo fator.
Linearidade
Limite de diluição: 600 U/L
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
115-1/50 50
Revisão: 14/12/
Procedimento
Pipetar nos tubos de ensaio: Branco Teste Calibrador Reagente 1 1 mL 1 mL 1 mL Amostra -- 0,01 mL -- Padrão -- -- 0,01 mL
Homogeneizar e incubar a temperatura ambiente durante 2 minutos.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar as preparações estabilizadas da linha Qualitrol - Labtest para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ Usar o Padrão (Ref. 115.2) ou calibrador pro- téico da série Calibra H da Labtest.
# Parâmetro definido pelo operador.
Linearidade
Limite de diluição: 130 mEq/L
UNID. mEq/L
DECIMAIS 0
LIM LIN. MIN 0
LIM LIN MAX 130
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 0.
ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX #
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #
Labtest - Serviço de Apoio ao Cliente - DDG 0800 0313411
Ref. Determinações
13-1/50 200 precipitações
Revisão: 20/06/
O Colesterol HDL Labtest Ref. 13 é composto somente do Reagente Precipitante e Padrão, sendo necessária a utilização do produto Co- lesterol Liquiform Labtest Ref. 76.
Procedimento Precipitação Amostra:
Em um tubo 12 x 75 colocar 0,25 mL de soro e 0,25 mL de Reagente Precipitante. Agitar vigorosamente por 30 segundos. A agitação é fundamental para a obtenção de re- sultados consistentes. Centrifugar a 3500 rpm pelo menos por 15 minutos para obter um sobrenadan- te límpido. Soros controle devem ser tratados da mesma for- ma.
Colorimetria: Branco Teste Padrão Sobrenadante --- 0,1mL --- Padrão (no^ 2) --- --- 0,1mL Reagente 1 (Ref. 76.1) 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Misturar e incubar em banho-maria a 37 °C duran- te 10 minutos e efetuar a medida contra o Branco.
Controle da Qualidade
Sugere-se utilizar preparações estabilizadas para controle interno da qualidade.
As informações a seguir devem ser aplicadas onde os respectivos sinais aparecem na apli- cação ao lado:
@ Usar o Padrão (Ref. 13.2) de 20 mg/dL. Con- siderando-se a diluição da amostra realizada no procedimento de precipitação, o valor a ser inseri- do no item de programação P1 será 40 mg/dL.
# Parâmetro definido pelo operador.
Linearidade
Limite de diluição: 200 mg/dL
UNID. mg/dL
DECIMAIS 0
LIM LIN. MIN 0000
LIM LIN MAX 200
ABS REAT MIN 0.
ABS REAT MAX 0.
ABS PAD MIN #
ABS PAD MAX #
VR/VN MIN #
VR/VN MAX #