UNIVERSIDADE FEDERAL DO TRIÂNGULO MINEIRO
AVALIAÇÃO MORFOLÓGICA E MORFOMÉTRICA
DO NERVO SURAL DE RATAS WISTAR EM
DIFERENTES FASES DO ENVELHECIMENTO:
ESTUDO EM NÍVEL DE MICROSCOPIA DE LUZ
ANDRÉ JERONIMO
UBERABA – MG
JULHO/2007
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Morfologia e morfometria do nervo sural em ratos em diferentes fases de envelhecimento, Notas de estudo de Anatomia
Este estudo investiga os aspectos morfológicos e morfométricos do nervo sural em ratos da linhagem wistar em diferentes fases de vida, comparando as alterações ao longo do nervo e entre os lados direito e esquerdo do mesmo animal. O objetivo é descrever os parâmetros normais da morfologia e morfometria do nervo sural em ratos fêmeas em diferentes idades, fornecendo dados essenciais para estudos de doenças que afetam o sistema nervoso periférico.
Tipologia: Notas de estudo
2022
1 / 46
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UNIVERSIDADE FEDERAL DO TRIÂNGULO MINEIRO
AVALIAÇÃO MORFOLÓGICA E MORFOMÉTRICA
DO NERVO SURAL DE RATAS WISTAR EM DIFERENTES FASES DO ENVELHECIMENTO: ESTUDO EM NÍVEL DE MICROSCOPIA DE LUZ
ANDRÉ JERONIMO
UBERABA – MG
JULHO/
ANDRÉ JERONIMO
AVALIAÇÃO MORFOLÓGICA E MORFOMÉTRICA
DO NERVO SURAL DE RATAS WISTAR EM DIFERENTES FASES DO ENVELHECIMENTO: ESTUDO EM NÍVEL DE MICROSCOPIA DE LUZ
TESE APRESENTADA AO CURSO DE PÓS-
GRADUAÇÃO EM PATOLOGIA, ÁREA DE
CONCENTRAÇÃO “PATOLOGIA GERAL” DA
UNIVERSIDADE FEDERAL DO TRIÂNGULO
MINEIRO COMO REQUISITO PARCIAL PARA A
OBTENÇÃO DO TÍTULO DE DOUTOR.
ORIENTADORA: Profª. Drª. VALÉRIA PAULA SASSOLI FAZAN
UBERABA – MG
JULHO/
TRABALHO REALIZADO NOS:
- Laboratório experimental da Disciplina de Anatomia Humana da
Universidade Federal do Triângulo Mineiro
- Laboratório experimental da Disciplina de Fisiologia da Universidade
Federal do Triângulo Mineiro
- Laboratório de Neurologia Aplicada e Experimental do Departamento de
Neurologia, Psiquiatria e Psicologia Médica da Faculdade de Medicina de
Ribeirão Preto – USP
- Laboratório de Microscopia e Morfometria do Setor de Cirurgia
Experimental de Departamento de Cirurgia e Anatomia da Faculdade de
Medicina de Ribeirão Preto – USP
APOIO FINANCEIRO:
- UFTM
- FUNEPU
- CAPES
- CNPq
- FAPESP
-FAEPA
“... E você aprende que realmente pode suportar, que é forte, e que
pode ir muito mais longe, depois de pensar que não pode mais. E que
realmente a vida tem valor e que você tem valor diante da vida,
porque nossas dádivas são traidoras, e nos fazem perder o bem que
poderíamos conquistar se não fosse o medo de tentar.”
Willian Shakespeare.
À Professora Doutora Valéria Paula Sassoli Fazan gostaria não só de
dedicar está página, mas todo meu percurso na pós-graduação. Sua sabedoria
cultural e humana é algo que servirá de aprendizado pelo resto da minha vida.
Sem estes preceitos, não chegaria até aqui.
Meus sinceros agradecimentos.
AGRADECIMENTOS
- Luciana Sayuri Sanada pela sua grande ajuda no laboratório para a
realização deste trabalho.
- Universidade de Uberaba pela oportunidade e reconhecimento do meu
trabalho.
- Aos professores da clínica e ao diretor do curso de fisioterapia da
Universidade de Uberaba, Prof. Jorge Alfredo Léo, pela compreensão e
incentivo.
- Ao Prof. Dr. Vicente de Paula Antunes Teixeira pelo grande apoio e
incentivo.
- As secretárias da Pós-Graduação, Denise e Nelma pela paciência e
disponibilidade de atendimento.
- A Carla Alem Domingues e Antônio Pedro Alem Sobrinho pelo
constante apoio e presença.
- A Maria Cristina, Aracy e Antônio Renato funcionários do laboratório
de Neurologia Aplicada e Experimental da Faculdade de Medicina de
Ribeirão Preto – USP, pelo excelente trabalho técnico.
- A Maria Tereza Maglia pelo trabalho primoroso realizado nos cortes
histológicos.
- Aos colegas da Pós-Graduação, que sempre disponíveis me ajudaram.
- Aos funcionários da disciplina de Anatomia da UFTM.
- Aos funcionários da Patologia Geral.
- Aos Professores da Banca de Qualificação.
- Aos funcionários da disciplina de Fisiologia e, em especial, aos do
biotério.
- Ao Funcionário João Carlos Ribas Neto, pelo serviços prestado com
cuidado dos animais, no biotério do laboratório de Neurologia aplicada
experimental.
RESUMO
Resumo
Tese de Doutorado André Jeronimo
A função dos nervos periférica é afetada pelo desenvolvimento e pelo envelhecimento. Entretanto, o conhecimento a respeito das diferenças entre os nervos de animais adultos e velhos tem sido embasado em comparações de apenas dois grupos experimentais e tem sido apontada a necessidade de múltiplos grupos experimentais nos estudos de desenvolvimento e envelhecimento. Apesar de algumas descrições de alterações morfológicas nos nervos periféricos de ratos velhos, a maioria dos estudos investigou nervos motores ou mistos, enquanto informações em nervos sensitivos são escassas. O nervo sural é amplamente utilizado em estudos experimentais que investigam lesão e regeneração do sistema nervoso periférico. Apesar dessa ampla utilização, informação a respeito dos aspectos morfológicos e morfométricos do nervo sural de animais velhos não é comum na literatura. Os objetivos do presente estudo foram investigar os aspectos morfológicos e morfométricos do nervo sural em ratos velhos. Para tanto, ratas da linhagem Wistar com 360 (N = 5), 640 (N = 5) e 720 (N = 4) dias de idade foram anestesiadas e perfundidas com solução fixadora (glutaraldeído a 2,5%, em tampão cacodilato de sódio 0,1M) e tiveram os segmentos proximais e distais dos nervos surais direito e esquerdo preparados para inclusão em resina epóxi. A morfometria em nível de microscopia de luz foi realizada com o auxílio de um programa de análise de imagens computacional. Nossos resultados não mostraram diferenças morfométricas significativas entre os segmentos proximais e distal, ou entre os lados direito e esquerdo dos mesmos níveis, em todos os grupos experimentais. Não foi observado aumento no tamanho das fibras mielínicas entre as idades de 360 a 720 dias. Também não foram observadas diferenças no número total de fibras mielínicas entre os grupos. A distribuição das fibras mielínicas se mostrou bimodal, sendo aquela dos animais com 720 dias de vidas desviada para a esquerda, indicando uma redução do diâmetro das fibras nesse grupo experimental.
ABSTRACT
Abstract
Tese de Doutorado André Jeronimo
Peripheral nerve function is significantly affected by maturation and ageing. However, knowledge regarding differences between the nerves of adult and aged animals has been based on comparisons of only two experimental groups, and it has been pointed out the need for multiple time points in maturation and ageing studies. Despite some descriptions of peripheral nerve morphologic alterations in aged rats, most of the studies used motor or sensory-motor nerves, while information on sensory nerves is scanty. The sural nerve in rats is widely used in experimental studies investigating injury and regeneration of the peripheral nervous system. Despite this wide utilization, information on morphological and morphometric aspects of aged rats sural nerve is not common in the literature. The aims of the present study were to investigate morphological and morphometric aspects of the sural nerve in aged rats. Female Wistar rats aged 360 (N = 5), 640 (N = 5) and 720 (N = 4) days were killed, and proximal and distal segments of the right and left sural nerves were prepared for epoxy resin embedding. Light microscopy morphometry was carried out with the aid of a computer software. Our results showed no morphometric differences between proximal and distal segments or between right and left sides at the same levels of the sural nerves in all experimental groups. No increase in fiber and axon sizes was observed from 360 to 720 days. Also, no difference in total myelinated fiber number was observed between groups. Myelinated fiber population distribution was bimodal, being the 720-days old animals’ distribution shifted to the left, indicating a reduction of the fiber diametes. The G ratio distribution of the 720-days old animals’ myelinated fiber was also shifted to the left, which suggests axonal atrophy. Morphological alterations due to ageing were observed, mainly related to the myelin sheath and endoneural vessels. The main alterations observed were: myelin splitting, enfolding and out folding, myelin sheath swelling, Schmidt-Lantermann incisures enlargement, presence
SUMÁRIO
4.5 – Histogramas de distribuição de diâmetro mínimo
Figura 24 : Área média dos axônios mielínizados dos nervos surais .................................. Figura 25 : Diâmetro mínimo médio dos axônios das fibras mielínicas dos nervos surais ............................................................................................... Figura 26 : Razão G média das fibras mielínicas dos nervos surais ................................... Figura 27 : Histogramas de distribuição de diâmetro mínimo das fibras mielínicas dos nervos surais de ratos do grupo I, animais com 360 dias de vida............................................................................. Figura 28 : Histogramas de distribuição de diâmetro mínimodos axônios mielinizados dos nervos surais de ratos do grupo I, animais com 360 dias de vida............................................................................ Figura 29 : Histogramas de distribuição de freqüência da razão G das fibras mielínicas dos nervos surais de ratos do grupo I,animais com 360 dias de vida ............................................................................
Figura 30 : Histogramas de distribuição de diâmetro mínimo das fibras mielínicas dos nervos surais de ratos do grupo II, animais com 640 dias de vida............................................................................. Figura 31 : Histogramas de distribuição de diâmetro mínimo dos axônios mielinizados dos nervos surais de ratos do grupo II, animais com 640 dias de vida............................................................................. Figura 32 : Histogramas de distribuição de freqüência da razão G das fibras mielínicas dos nervos surais de ratos do grupo II, animais com 640 dias de vida............................................................................. Figura 33 : Histogramas de distribuição de diâmetro mínimodas fibras mielínicas dos nervos surais de ratos do grupo III, animais com 720 dias de vida............................................................................. Figura 34 : Histogramas de distribuição de diâmetro mínimodos axônios mielinizados dos nervos surais de ratos do grupo III, animais com 720 dias de vida............................................................................. Figura 35 : Histogramas de distribuição de freqüência da razão G das fibras mielínicas dos nervos surais de ratos do grupo III,animais com 720 dias de vida.............................................................................
Figura 36 : Histogramas de distribuição de freqüência do diâmetro mínimo das fibras mielínicas dos nervos surais................................................. Figura 37 : Histogramas de distribuição de freqüência do diâmetro mínimo dos axônios mielinizados dos nervos surais.......................................... Figura 38 : Histogramas de distribuição de freqüência da razão G das fibras mielínicas dos nervos surais...............................................................
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 : Parâmetros morfométricos fasciculares dos nervos suraisdos ratos do grupo I. ..........................................................................................
Tabela 2: Parâmetros morfométricos fasciculares dos nervos surais dos ratos do grupo II .......................................................................................... Tabela 3: Parâmetros morfométricos fasciculares dos nervos surais dos ratos do grupo III ........................................................................................ Tabela 4: Parâmetros morfométricos das fibras mielínicas e dos axônios mielinizados dos nervos surais dos ratos do grupo I.......................................... Tabela 5: Parâmetros morfométricos das fibras mielínicas e dos axônios mielinizados dos nervos surais dos ratos do grupo II......................................... Tabela 6: Parâmetros morfométricos das fibras mielínicas e dos axôniosmielinizados dos nervos surais dos ratos do grupo III.......................................
Tabela 7: Resumo dos principais achados no sistema nervoso periférico, decorrentes do envelhecimento .......................................................................