TINCIONES
Las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan en el
laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas.
La tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisis
bacteriológico
Tinción de Gram Esta tinción es un procedimiento de gran utilidad empleado en los
laboratorios donde se manejan pruebas microbiológicas. Es definida como una tinción
diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos grandes grupos:
bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas.
Fue desarrollada por el científico danés Hans Christian Gram en 1884; hoy en día, sigue
siendo una de las tinciones más utilizadas universalmente debido a lo económico, sencillo
y eficaz que resulta.
En microbiología clínica resulta de gran utilidad, ya que a partir de muestras clínicas
directas provenientes de sitios estériles se puede saber de manera rápida las
características de la muestra y hacer una diferencia de los potenciales microorganismos
causantes de una infección.
Los principios de la tinción de Gram están basados en las características de la pared
celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada
microorganismo. La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida por
una capa fina de peptidoglicano y una membrana celular externa, mientras que las
bacterias Gram positivas poseen una pared celular gruesa constituida por peptidoglicano,
pero no cuentan con membrana celular externa; así pues, la composición química y el
contenido de peptidoglicano en la pared celular de las bacterias Gram negativas y Gram
positivas explica y determina las características tintoriales
Procedimiento.- La tinción de Gram se basa en colocar como colorante primario cristal
violeta, el cual tiene afinidad con el peptidoglicano de la pared bacteriana.
Posteriormente, se coloca lugol, el cual sirve como mordiente e impide la salida del cristal
violeta por la formación de un complejo cristal violeta-yodo que satura los espacios del
peptidoglicano de la pared bacteriana.
Luego, se coloca una mezcla de alcohol-acetona, la cual deshidrata la pared bacteriana y
cierra los poros de la misma, también destruye la membrana externa de las bacterias
Gram negativas debido a que ésta es soluble a la acción de solventes orgánicos, como la
mezcla de alcoholacetona.
Las bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de peptidoglicano, retienen
con mayor fuerza este complejo, mientras que las Gram negativas no lo pueden retener
por tener menos cantidad de peptidoglicano.
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LÓPEZ-JÁCOME, Luis Esaú, et al. Las tinciones básicas en el laboratorio de
microbiología. Investig. en discapacidades, 2014, vol. 3, no 1, p. 10-18.
