Tinción de Gram: Técnica y
Materiales Necesarios
Tinción de Gram: Un Enfoque Detallado
Pasos Previos a la Tinción de Gram
Colocar los portaobjetos sobre un puente de vidrio.
Agregar unas gotas del colorante primario, el cristal violeta, y dejar
actuar durante un minuto.
Escurrir el colorante y lavar con agua hasta que salga incolora.
Aplicar el siguiente reactivo, el Lugol, y dejar actuar durante un
minuto.
Escurrir el exceso de Lugol y lavar con agua.
Diferenciación entre Bacterias Gram Positivas y Gram
Negativas
Realizar la descoloración, que es el punto crítico de la técnica de
tinción de Gram, ya que en esta etapa se realiza la diferenciación entre
las bacterias Gram positivas y Gram negativas.
Agregar unas gotas de acetona-alcohol hasta que el reactivo escurra
incoloro.
Lavar el exceso de reactivo.
Coloración Final
Agregar unas gotas del colorante de contraste, la safranina, y dejar
actuar durante un minuto.
Escurrir el exceso de safranina y lavar con agua hasta que salga
incolora.
Dejar secar la muestra.
Observación al Microscopio
Observar la muestra al microscopio óptico, utilizando aceite de
inmersión.
Reactivos y Materiales Necesarios
Los reactivos y materiales necesarios para la tinción de Gram incluyen:
Cristal violeta
Lugol
Alcohol-acetona
Safranina
Poceta con agua de la llave
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