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Tripteína Soya Agar: Un Medio de Cultivo para Microorganismos, Monografías, Ensayos de Microbiología

El uso y componenes químicos de tripteína soya agar, un medio de cultivo utilizado para el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos aerobios y anaerobios. El medio se complementa con sangre para el crecimiento de microorganismos exigentes y permite la observación claras de reacciones de hemólisis. El documento también incluye instrucciones para la preparación y almacenamiento del medio.

Qué aprenderás

  • ¿Qué nutrientes provee el Tripteína Soya Agar para el crecimiento de microorganismos?
  • ¿Cómo se utiliza el Tripteína Soya Agar para el crecimiento de microorganismos?
  • ¿Cómo se prepara y almacena el Tripteína Soya Agar?

Tipo: Monografías, Ensayos

2018/2019

Subido el 20/10/2022

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USO
Medio utilizado para propósitos generales, favorece el desarrollo y
aislamiento de una gran variedad de microorganismos
aerobios, y anaerobios facultativos y estrictos.
Al ser suplementado con sangre permite el crecimiento de micro-
organismos exigentes y la clara visualización de reacciones de he-
mólisis.
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor-
teamérica (EP, JP y USP respectivamente).
FUNDAMENTO
En el medio de cultivo, la tripteína y la peptona de soya aportan
nutrientes ricos en péptidos, aminoácidos libres, bases púricas y
pirimídicas, minerales y vitaminas. La peptona de soya además es
fuente de hidratos de carbono que estimulan el crecimiento de
diversos microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance
osmótico y el agar es el agente solidificante.
Puede ser utilizado como base a la cual se suplementa con nu-
trientes o con antimicrobianos, lográndose un medio enriquecido o
selectivo de acuerdo al aditivo.
El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril
(Britasheep) promueve el desarrollo de bacterias exigentes en
sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación de las
reacciones de hemólisis.
El agregado de extracto de levadura en concentración 0,6 % favo-
rece el crecimiento de especies de Listeria.
Es un medio adecuado para cultivar y mantener cepas de Aeromo-
nas, y aumentando el porcentaje de cloruro de sodio, para mante-
ner cepas de algunos Vibrios (excepto V. cholerae).
CONTENI DO Y COMPOSICIÓN
Código B0210205: envase x 100 g.
Código B0210206: envase x 500 g.
Tripteína Soya Agar
FÓRMULA (en gramos por litro)
TRIPTEÍNA ..................................................................................................................................15.0
PEPTONA DE SOYA .............................................................................................................5.0
CLORURO DE SODIO .........................................................................................................5.0
AGAR ...............................................................................................................................................15.0
pH FINAL: 7.3 ± 0.2
B0210206
B0210205
INSTRUCCIONES
Disolver 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar y dejar
reposar 5 minutos. Calentar agitando suavemente y hervir durante
1 o 2 minutos hasta su disolución total. Distribuir en recipientes
apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121 ºC durante 15 mi-
nutos.
Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina
desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y
enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri
estériles.
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar.
Suplementado con sangre: color rojo cereza.
ALMACENAMIENTO
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
PROCEDIMIENTO
Siembra
Por inoculación directa del material en estudio, sobre la superficie
del medio de cultivo.
Incubación
El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán
del microorganismo que se quiera recuperar.
En general se recomienda:
Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 33-37 º C durante
18 a 24 horas.
Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
fera con 5 % de CO2, a 33-37 ºC durante 24-48 horas.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Observar las características de las colonias.
Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
nes de hemólisis:
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USO

Medio utilizado para propósitos generales, favorece el desarrollo y aislamiento de una gran variedad de microorganismos aerobios, y anaerobios facultativos y estrictos. Al ser suplementado con sangre permite el crecimiento de micro- organismos exigentes y la clara visualización de reacciones de he- mólisis. Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- teamérica (EP, JP y USP respectivamente).

FUNDAMENTO En el medio de cultivo, la tripteína y la peptona de soya aportan nutrientes ricos en péptidos, aminoácidos libres, bases púricas y pirimídicas, minerales y vitaminas. La peptona de soya además es fuente de hidratos de carbono que estimulan el crecimiento de diversos microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante. Puede ser utilizado como base a la cual se suplementa con nu- trientes o con antimicrobianos, lográndose un medio enriquecido o selectivo de acuerdo al aditivo. El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep) promueve el desarrollo de bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación de las reacciones de hemólisis. El agregado de extracto de levadura en concentración 0,6 % favo- rece el crecimiento de especies de Listeria. Es un medio adecuado para cultivar y mantener cepas de Aeromo- nas, y aumentando el porcentaje de cloruro de sodio, para mante- ner cepas de algunos Vibrios (excepto V. cholerae).

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN Código B0210205: envase x 100 g. Código B0210206: envase x 500 g.

Tripteína Soya Agar

FÓRMULA (en gramos por litro) TRIPTEÍNA ..................................................................................................................................15. PEPTONA DE SOYA ............................................................................................................. 5. CLORURO DE SODIO......................................................................................................... 5. AGAR ...............................................................................................................................................15. pH FINAL: 7.3 ± 0.

B0210205^ B

INSTRUCCIONES

Disolver 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar y dejar reposar 5 minutos. Calentar agitando suavemente y hervir durante 1 o 2 minutos hasta su disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121 ºC durante 15 mi- nutos. Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estériles.

CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento. Medio de cultivo preparado: color ámbar. Suplementado con sangre: color rojo cereza.

ALMACENAMIENTO Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

PROCEDIMIENTO Siembra Por inoculación directa del material en estudio, sobre la superficie del medio de cultivo.

Incubación El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán del microorganismo que se quiera recuperar. En general se recomienda: Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 33-37 º C durante 18 a 24 horas. Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós- fera con 5 % de CO 2 , a 3 3 -37 ºC durante 24-48 horas.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Observar las características de las colonias. Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio- nes de hemólisis:

CONTROL DE CALIDAD

Tripteína Soya Agar suplementado con 5% de sangre ovina:

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Medio sin inocular Sin cambios

03 /

1 - REV.

2

DIAGNÓSTICO IN VITRO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE DETERMINACIONES

LOTE Nº FECHA DE VENCIMIENTO

LÍMITE DE TEMPERATURA

INSTRUCCIONES DE USO

MICROORGANISMOS Escherichia coli ATCC 8739 Staphylococcus aureus ATCC 6538 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Enterococcus faecalis ATCC 29212

MICROORGANISMOS Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 Streptococcus pneumoniae ATCC 49619

CRECIMIENTO Satisfactorio

Satisfactorio

Satisfactorio

Satisfactorio

HEMÓLISIS Beta

Alfa

Alfa

CRECIMIENTO Satisfactorio

Satisfactorio

Satisfactorio

Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los microorganismos. Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me- dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre- dedor de la colonia en estudio.

MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS

Equipos y material de laboratorio, microorganismos para con- trol de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requerimiento.

PRECAUCIONES

  • Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- sivo.
  • No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- ñado.
  • No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
  • Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- to.
  • Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad establecidas por el laboratorio.
  • Las características del producto pueden alterarse si no se conser- va apropiadamente.
  • Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del mismo según reglamentaciones vigentes.

REFERENCIAS

  • MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification- maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti- more, Md.
  • Holt, Krieg, Sneath, Staley and Williams (ed.). 1994. Bergey’s Manual™of determinative bacteriology, 9th ed. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
  • Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
  • Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen- tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de Productos no Obligatoriamente Estériles.
  • United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (61) Microbiolo- gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration Tests. Harmonized Method.
  • United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi- cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro- organisms. Harmonized Method.

INDICACIONES AL CONSUMIDOR Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

SÍMBOLOS UTILIZADOS

AUTORIZACIÓN ANMAT

PM -1292 - 22

Dir. Técnico: Bioq. Alejandro Rossi