Lab de biología molecular, Esquemas y mapas conceptuales de Fundamentos del Negocio

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LAB

BIOMOL

1. Lisis de la pared célular bacteriana (peptidoglicano) utilizando la Lisozima A.
2. Degradación de lipidos y proteínas de la membrana plasmática y de la membrana externa (gram) con detergente SDS (dodecil sulfato de sodio)
3. Uso de la serin-proteasa (proteinasa K) que degrada las proteínas por su enlace peptídico que este al aldo de un amino acido aromatico o alinfatico.
4. Se separan todos los componentes celulares qur resultan de la lisis célular usando cloroformo-alcohol isoamilico (genera 3 fases)
5. Finalmente se extrae la fase acuosa y se deshidrata el ADN al agregarle isopropanol frío con una sal (acetato de sodio-Na+)
   6. ADN se lava y seca y luego se disuelve en agua ultrapura.
6. Fórmula para el detergente (calcular el vólumen del detergente)
7. Se extrae con un gotero la fase líquida superior (ADN), se añade la sal y se deshidrata con el isopropanol frío.
8. Se centrifuga y en el pellet está el ADN (sobrenadante e isopropanol).
   11. Se lava el pellet con etanol 70%
   12. Centrifugación-Se bota el sobrenadante de etanol 2 veces.
9. Suspender el ADN en agua ultra pura.
   8. Las 3 fases del cloroformo-alcohol isoamilico