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Caracteristicas ye especificasciones de agar cetridime
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeru- ginosa y de otras especies del género. Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Norteamérica (EP, JP y USP respectivamente).
FUNDAMENTO Su formulación permite el crecimiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y estimula la formación de pigmentos. Es éste un medio muy semejante al King A, en el cual la peptona de gelatina aporta los nutrientes para el desarrollo microbiano. El cloruro de magnesio y el sulfato de potasio promueven la formación de piocianina, pio- verdina, piomelanina y fluoresceína de P. aeruginosa. La cetrimida es un detergente catiónico que actúa como agente inhibidor, libera el nitrógeno y el fósforo de las células de casi toda la flora acompa- ñante, aunque inhibe también algunas especies de Pseudomonas. El agar es el agente solidificante.
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN Código B0411584: 6 frascos x 50 ml
FÓRMULA
Peptona de gelatina 20.0 g Cloruro de magnesio 1.4 g Sulfato de potasio 10.0 g Cetrimida 0.3 g Agar 13.6 g Glicerina 10 mL Agua purificada 1000 mL
pH final: 7.2 ± 0. La fórmula puede ser ajustada y/o suplementada para cumplir los criterios de desempeño y aceptación de producto, cumpliendo su uso previsto.
INSTRUCCIONES Colocar los frascos cerrados en baño maría y llevar a ebullición para fundir el medio de cultivo sólido contenido en los mismos. Una vez que se ha fundido el medio de cultivo, retirar cuidadosa- mente los frascos del baño maría y dejar enfriar. Cuando alcanzan temperatura 45-50 ºC, abrirlos y distribuir asépti- camente en placas de Petri estériles.
Medio de cultivo color ámbar claro.
ALMACENAMIENTO Medio de cultivo listo para usar en frascos a 10-35 ºC. Cuando se distribuye en placas de Petri, debe conservarse a 2-8 ºC.
PROCEDIMIENTO
Siembra En superficie, por inoculación directa de la muestra estriando o a partir de un caldo de enriquecimiento por ejemplo Cerebro Corazón Infusión (Britania) o Tripteína Soya Caldo (Britania).
Incubación En aerobiosis, a 35-37 °C durante 24-48 horas.
Interpretación de los resultados Observar el crecimiento microbiano, las características de las colonias y la producción de pigmentos.
La presencia de un color verde-azulado corresponde a producción de piocianina, mientras que un color verde corresponde a la pro- ducción de pioverdina y un color rosa claro, rojizo o marrón oscuro corresponde a la producción de piorrubina. Examinar las placas bajo luz ultravioleta, ya que la producción de fluoresceína se observa de color amarillo verdoso brillante que difunde en el agar a partir del crecimiento microbiano.
CONTROL DE CALIDAD
Microorganismos Crecimiento Color de la colonia
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Amarillo verdoso-azulado ATCC 27853 Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Amarillo verdoso-azulado ATCC 9027 Escherichia coli Inhibido ---- ATCC 25922 Escherichia coli Inhibido ---- ATCC 8739 Staphylococcus aureus Inhibido ---- ATCC 25923 Staphylococcus aureus Inhibido ---- ATCC 6538
Resultado de medio sin inocular: sin cambio.
LIMITACIONES
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- miento.
PRECAUCIONES
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Rev. 06/
Nº DE LOTE Nº DE CÓDIGO USO IN VITRO ESTÉRIL LÍMITE DE TEMPERATURA
FECHA DE VENCIMIENTO
FABRICANTE CONSULTE LAS INSTRUCCIONES DE USO
Nº DE TEST