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U N I V E R S I D A D D E G U A Y A Q U I L
F A C U L T A D D E C I E N C I A S Q U Í M I C A S
B I O Q U Í M I C A Y F A R M A C I A
T E M A : A C L A R A M I E N T O D E I N U L I N A - A C L A R A M I E N T O D E
B R O M O F T A L E I N A
S U B G R U P O N ° 5
F A R M A C O L O G Í A I P R
INTEGRANTES:
-PIN BEJARANO JONATHAN JOSUE
-VIDAL CRUZ NICOLE JAMILEC
-YAGUAL ZAMBRANO LUISA FERNANDA
DOCENTE: Msc. Annie Elizabeth Orellana Zapata
CURSO: 6-4A
CICLO CI 2025-
Aclaramiento de Inulina
Es el procedimiento mediante el cual se determina la capacidad de filtración de los glomérulos (las principales estructuras de filtración del riñón) midiendo la velocidad.
La medición del aclaramiento de inulina sigue siendo el "estándar de oro" para la estimación de la TFG. La TFG se puede determinar mediante dos enfoques principales:
Determinación de la tasa de excreción urinaria de un trazador utilizando recolecciones de orina cronometradas. Determinación de la cinética de eliminación de un trazador del plasma después de una única inyección en bolo.
La prueba implica la inyección de una dosis en bolo de inulina, seguida de una infusión de mantenimiento diseñada para producir una concentración plasmática constante. Luego se recolecta una serie de muestras de orina cronometradas y se extrae sangre para la medición de inulina en los puntos medios de los períodos de recolección.
I N U L I N A - B R O M O F T A L E I N A
La BSF es una ftaleína halogenada (fenoltetrabromosulftaleína) que tiene la particularidad de ser eliminada del torrente circulatorio casi exclusivamente por el hígado, el cual la excreta al intestino por la bilis.
La BSF inyectada por vía endovenosa se une rápidamente a las proteínas plasmáticas, especialmente la albúmina, la BSF atraviesa de esta forma las microvellosidades del polo sinusoidal del hepatocito y ya en el interior de la célula hepática es conjugada parcialmente con la cisteína glicina y el ácido glutámico.
Las dos fracciones libres y conjugadas son transportadas al polo biliar llegando en 10 a 15 segundos al intestino y se eliminan en las materias fecales.
Aclaramiento de Bromoftaleina
Preparar solución de inulina-FITC 5% al 3%. Se disuelve FITC-inulina en solución salina, se dializa para eliminar el exceso de fluoresceína libre y se esteriliza por filtración. Implantación de bombas: Se implantan quirúrgicamente dos microbombas osmóticas en la cavidad peritoneal del ratón anestesiado, las cuales liberan FITC-inulina de manera continua durante 7 días.
Método de bomba microosmótica
Recolección de orina y sangre Los ratones se colocan en jaulas metabólicas para recolectar orina durante 24 horas en el día 7 tras la implantación. Se recoge sangre al final del periodo de recolección de orina para medir la concentración plasmática de FITC-inulina. Se recupera la FITC-inulina residual de la jaula mediante enjuagues para asegurar que toda la inulina excretada sea contabilizada. Tanto la orina como el plasma se ajustan a pH 7.4 y se mide la fluorescencia en un lector de placas, usando curvas estándar para cuantificar la concentración de inulina.
Método de inyección de bolo único
Se inyecta una dosis única de FITC-inulina por vía intravenosa (retroorbitaria) bajo anestesia ligera. Se toman muestras de sangre a intervalos específicos (3, 7, 10, 15, 35, 55 y 75 minutos post-inyección). Medición de la concentración: Se determina la concentración de FITC-inulina en plasma por fluorescencia.
Cálculo de la TFG a partir del aclaramiento plasmático:
- Se utiliza un modelo bicompartimental: la fase rápida corresponde a la redistribución y la fase
lenta a la eliminación renal.
- Se ajustan los datos a una curva de decaimiento biexponencial para obtener los parámetros de
eliminación.
R e s u l t a d o s
C o n c l u s i ó n
E l e s t u d i o d e m o s t r ó q u e t a n t o e l m é t o d o d e i n f u s i ó n
c o n t i n u a c o n m i n i b o m b a c o m o e l m é t o d o d e b o l o ú n i c o
( m o d e l o b i c o m p a r t i m e n t a l ) o f r e c e n v a l o r e s c o n s i s t e n t e s
y c o m p a r a b l e s d e T F G e n r a t o n e s C 5 7 B L / 6 J , c o n v a l o r e s
p r o m e d i o d e 2 1 1. 1 ± 2 6. 6 μ l / m i n y 2 3 6. 7 ± 1 6. 6 μ l / m i n ,
r e s p e c t i v a m e n t e.
C A S O D E E S T U D I O : E v a l u a c i ó n d e l a c l a r a m i e n t o d e b r o m o f t a l e í n a
e n r a t a s W i s t a r p a r a e l a n á l i s i s d e l a f u n c i ó n h e p á t i c a
Resultados El estudio demostró que la administración intravenosa de bromoftaleína sódica (BSP) permite una evaluación confiable de la función hepática excretora en ratas Wistar, mostrando valores de aclaramiento significativamente distintos entre el grupo control, la rápida eliminación plasmática de BSP (aclaramiento promedio: 2.1 ml/min; retención a los 45 minutos: 9.8%) indicó un hígado funcionalmente competente. En contraste, las ratas tratadas con CCl₄ presentaron un aclaramiento significativamente reducido (0.8 ml/min) y una retención aumentada (51.6%). Esta alteración sugiere que el CCl₄ afectó directamente la capacidad de los hepatocitos para captar y excretar sustancias orgánicas, lo cual es consistente con el daño inducido por este compuesto, conocido por causar necrosis centrolobulillar, disfunción mitocondrial y disminución en la secreción biliar
Conclusión
B I B L I O G R A F Í A
1.Makanjuola D, Lapsley M. Aclaramiento de inulina. Capítulo - Los riñones, la función renal y la enfermedad
renal [Internet]. Bioquímica Clínica: Aspectos Metabólicos y Clínicos (3a Edición). 2014. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/inulin-clearance
2.Qi Z, Whitt I, Mehta A, Jin J, Zhao M, Harris RC, et al. Serial determination of glomerular filtration rate in
conscious mice using FITC-inulin clearance. Am J Physiol Renal Physiol [Internet]. 2004;286(3):F590-6. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1152/ajprenal.00324.
3.Escobar AS, Hasday RB, Miguel B. Aclaramiento hepático de la bromosulftaleína. Fundamentos de la prueba y
resultados obtenidos en diversas hepatopatías. Rev Cub Med. 1974;13(1):45–54.
4 .Lopez PO, Rodríguez JDG, Nieto VG. Pruebas de función renal. Glomerular y tubular [Internet].
Nefrologiaaldia.org. 2024. Disponible en: https://www.nefrologiaaldia.org/es-articulo-pruebas-funcion-renal- 634
