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Excelencia en Educación Tecnológica: Prácticas de Laboratorio de Biología, Guías, Proyectos, Investigaciones de Biología

Un manual de prácticas de laboratorio de biología del instituto tecnológico superior de purísima del rincón. Cubre temas como bioseguridad, microscopía, extracción de adn, estructura celular y teoría de la generación espontánea. Cada práctica incluye una introducción, objetivos, materiales y métodos, y en algunos casos, discusión y conclusiones. Además, se proporciona un anexo con la preparación de soluciones y colorantes utilizados en las prácticas. Este manual puede ser útil para estudiantes universitarios de carreras relacionadas con la biología, como ingeniería bioquímica, que necesiten reforzar sus conocimientos prácticos en el laboratorio.

Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones

2022/2023

Subido el 23/03/2023

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Excelencia en Educación Tecnológica®
“Surcando las Bases del Éxito”
Instituto Tecnológico Superior de
Purísima del Rincón
Academia de Ingeniería Bioquímica
Manual de Prácticas
BIOLOGÍA
Recopilado por:
Fátima Milagro Pérez Aguirre
Gustavo Hernández Mendoza
Purísima del Rincón, Gto., a 20 de enero de 2023
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¡Descarga Excelencia en Educación Tecnológica: Prácticas de Laboratorio de Biología y más Guías, Proyectos, Investigaciones en PDF de Biología solo en Docsity!

Excelencia en Educación Tecnológica®

Instituto Tecnológico Superior de

Purísima del Rincón

Academia de Ingeniería Bioquímica

Manual de Prácticas

BIOLOGÍA

Recopilado por:

Fátima Milagro Pérez Aguirre

Gustavo Hernández Mendoza

Purísima del Rincón, Gto., a 20 de enero de 2023

Excelencia en Educación Tecnológica®

  • Práctica 1 Bioseguridad Contenido
  • Práctica 2 Microscopía
  • Práctica 3 Obtención del ADN
  • Práctica 4 Estructura celular
  • Práctica 5 Teoría de la Generación espontánea
  • Práctica 6 Respiración celular
  • Anexo 1 Preparación de soluciones y colorantes

Excelencia en Educación Tecnológica® o Aplicadores de madera (Opción hisopos estériles caja) o Caja de portaobjetos-GRUPAL o Caja de cubreobjetos-GRUPAL o 10 ámpulas de agua inyectable de 10 mL o Cubre bocas o Guantes de látex/nitrilo o Rollo de papel aluminio o Rollo de toallas de papel o 4 goteros o 2 jeringas de 10 mL o 2 Encendedores o Tijeras o Cutter o 2 paños de microfibra o Gel y jabón antibacterial o Detergente para trastes líquido o Fibra para lavar trastes o Envase atomizador con alcohol al 70% Cuestionario

  1. Describe brevemente las normas básicas de conducta que se deben observar en todo laboratorio.
  2. Antes de manipular una sustancia, ¿qué es lo que se debe de hacer?
  3. ¿Cuáles son las causas más frecuentes de incendio en un laboratorio de química?
  4. Si un compañero ha ingerido una sustancia corrosiva y ésta le ha afectado la garganta, la tráquea, etc., ¿por qué de provocársele el vómito?
  5. ¿Por qué son necesarios los pictogramas?
  6. Enlista 5 frases R y 5 frases S del HCl y NaOH Bibliografía Gómez M., Matesanz A.I., Sánchez, A. y Souza P. (2005) Laboratorio de Química. 2ª Edición. Ed. UAM. Lister, T. (2002) Experimentos de Química Clásica (“The Royal Society of Chemistry”). Editorial Síntesis. Biblioteca de Químicas. 1ª Edición. Manual de Seguridad del Laboratorio General de Bioquímica. Mercedes Martín y otros. (1994) Programa-Guión de Prácticas de Química. 1ªEdición. Editorial Hespérides.

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Práctica 2 Microscopía

Introducción El tamaño de las células escapa al poder de resolución del ojo que se define como la distancia mínima entre dos puntos para que puedan verse como objetos separados. El descubrimiento de las células fue posible a partir de la invención del microscopio compuesto. El conocimiento de la célula y el papel que juega en la formación de los tejidos animales y vegetales ha avanzado de manera paralela al perfeccionamiento de las técnicas de microscopía. Una célula animal típica mide entre 10 y 20 mm de diámetro, unas cinco veces menos que el diámetro de la partícula más pequeña observable por el ojo humano. Se han desarrollado diferentes sistemas de iluminación para el microscopio, que permiten observar células o tejidos vivos, o fijados y teñidos. El microscopio de campo claro es útil para la observación de material teñido, la tinción incrementa el contraste entre la muestra y el medio que lo rodea. La imagen formada resalta sobre un fondo blanco brillante. En este sistema, el trayecto que sigue la luz va desde la lámpara hasta el ojo del observador pasando por un sistema de lentes que la alinea y la concentra. August Köhler (1866-1948), físico alemán, desarrolló un sistema que permite el alineamiento del sistema óptico con el sistema de iluminación sobre un mismo eje. Esto se realiza tomando como referencia el diafragma de campo, que es un dispositivo que se encuentra sobre a la fuente de luz, que regula la apertura para el paso de ésta. El diafragma de campo permite centrar el condensador móvil. La iluminación de Köhler crea un campo visual que ilumina uniformemente el espécimen. Esta técnica evita la aberración cromática, mejorando la resolución de las imágenes. Se pueden cambiar los objetivos (10X, 40X y 100X), sin tener que volver a alinear el sistema. Para el uso correcto del microscopio es indispensable que al inicio de cualquier observación se realice la iluminación de Köhler alineando el condensador con respecto a la fuente de luz, su finalidad es obtener la iluminación óptima de la muestra. Objetivos Identificar las partes del microscopio de campo claro, aprender a realizar la iluminación de Köhler y observar diferentes tipos celulares.

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3. Desprenda un fragmento de epidermis de cebolla, deposítelo en el portaobjetos cuidando que quede completamente extendido, agregue una gota de azul de metileno al 0.2%, coloque el cubreobjetos y observe con el objetivo de 10X y de 40X. 4. En un portaobjetos deposite una hoja de elodea, ponga una gota de safranina, coloque un cubreobjetos y observe con los objetivos de 10X y 40X. Resultados Esquematice las células de las muestras observadas con los objetivos de 10X, 40X y 100X, anotando el nombre de la célula, los componentes celulares identificados, así como el aumento total empleado (para lo cual se multiplica el aumento del objetivo por el aumento del ocular). Discusión Discutir los resultados con base al fundamento del microscopio. Conclusiones Sintetizar brevemente los puntos más relevantes, aportando los conocimientos explorados a lo largo de la experimentación. Cuestionario

  1. Indique la importancia del microscopio de campo claro en la investigación científica.
  2. ¿Qué importancia tiene realizar la iluminación de Köhler?
  3. ¿Qué cuidados hay que tener al utilizar el aceite de inmersión?
  4. Indique los componentes celulares que haya observado en esta práctica en cada muestra.
  5. Diga las diferencias y semejanzas que hay entre las células animales y vegetales.
  6. ¿Se logró el objetivo de la Práctica? ¿Por qué? Bibliografía Barrera-Escorcia H., Cárdenas-Reygadas., R. 1997. El Microscopio Óptico. Plaza y Valdés Editores. México, D.F. Karp, G. 2009. Biología celular y molecular: conceptos y experimentos. McGraw- Hill/Interamericana. México. Keller, E, Goldman, D. R. 2006. Light Microscopy. En: Basic Methods in Microscopy. Protocols and Concepts from Cells: A Laboratory Manual. Spector D, Goldman RD eds. Cold Spring Harbor Laboratory Press. Cold Spring Harbor. New York.

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Práctica 3 Obtención del ADN

Introducción El ADN es una de las partes fundamentales de los cromosomas, son estructuras constituidas por dos pequeños filamentos o brazos, que pueden ser iguales o desiguales, están unidos por un punto común llamado Centrómero; varían en forma y tamaño, pueden verse fácilmente al momento de la división celular por medio de un microscopio. Los cromosomas químicamente están formados por proteínas y por el Ácido desoxirribonucleico o ADN. Estructura del ADN El ADN está formado por unidades llamadas nucleótidos, cada una de las cuales tiene tres sustancias: el ácido fosfórico, un azúcar de cinco carbonos llamada pentosa y una base nitrogenada. El ácido fosfórico forma el grupo fosfato; la base nitrogenada es de cuatro clases: adenina (A), guanina (G), citocina (C) y timina (T). Según los descubridores del ADN, James Watson y Francis Crick, el ADN está formado por una doble cadena de nucleótidos que forman una especie de doble hélice semejante a una escalera en espiral; a los lados se disponen en forma alternada un fosfato y un azúcar y en los peldaños dos bases nitrogenadas. Funciones y Propiedades del ADN

  • El ADN controla la actividad de la célula. Es el que lleva la información genética de la célula, ya que las unidades de ADN, llamadas genes, son las responsables de las características estructurales y de la transmisión de estas características de una célula a otra en la división celular. Los genes se localizan a lo largo del cromosoma.
  • El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la división celular para formar dos moléculas idénticas, para lo cual necesita que en el núcleo existan nucleótidos, energía y enzimas.
  • Todos los seres vivos contienen ADN desde una bacteria hasta un elefante o un árbol. La diferencia entre cada uno de ellos se debe a la secuencia y tamaño de la cadena de ADN que contiene cada especie.
  • El ADN se asocia a proteínas, con las que toman una conformación tridimensional específica, en el que las proteínas, denominadas histonas, están envueltas por la molécula. Objetivos Extraer e identificar el ADN a partir del rompimiento y separación de las estructuras que lo envuelven y protegen en las células vegetales.

Excelencia en Educación Tecnológica® Discusión Discutir los resultados con base a la morfología reportada por otros autores. Conclusiones Sintetizar brevemente los puntos más relevantes, aportando los conocimientos explorados a lo largo de la experimentación. Cuestionario

  1. ¿Cuál es la función del ADN en la célula?
  2. ¿Qué estructuras de la célula protegen al ADN?
  3. ¿Qué función tiene el detergente para la extracción del ADN? (recuerda que los detergentes actúan sobre los lípidos)
  4. El ablandador contiene enzimas que destruyen proteínas. Explica para qué se utiliza en el experimento.
  5. ¿A qué sustancia es más afín el ADN, al agua o al alcohol? Bibliografía Brewer, C. y Smith, D. (2011). Vision and change in undergraduate biology education: a call to action. Washington DC, USA: American Association for the Advancement of Science. [ Links ] Ceretti, H. y Zalts, A. (2000) Experimentos en contexto. Química. Manual de Laboratorio. Buenos Aires, Argentina: Prentice Hall. [ Links ] Cohn, E. (1925). The physical chemistry of the proteins. Physiological Reviews, 5(3), 349-437. [ Links ] Esteban, R., Marcos-Merino, J. M. y Ochoa de Alda, J. A. G. (2019). Extracción de ADN con material cotidiano: diseño, implementación y validación de una intervención activa interdisciplinar. Educación Química, 30(1), 42-57. [ Links ]

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Práctica 4 Estructura celular

Introducción La célula es la unidad fundamental de los seres vivos. Existen organismos unicelulares como el paramecium , la amiba, la euglena o la bacteria y organismos pluricelulares, que están formados por tejidos, es decir, por un conjunto de células que cumplen una función específica. No obstante, cada célula está limitada y protegida por una membrana celular, y tiene su propio material genético y metabolismo (el cual le permite cumplir con sus funciones vitales y reproducirse). Las células eucarióticas presentan gran variedad de formas de acuerdo con su función, e incluso algunas no presentan forma fija: pueden ser redondeadas, elípticas, cuadradas, aplanadas, fusiformes, estrelladas, prismáticas etcétera, es decir, no hay un prototipo de la estructura celular. Objetivos Reconoce a la célula como unidad fundamental de los seres vivos a través de la observación de células vegetales. Materiales y Métodos Metodología ACTIVIDADES PREVIAS: Coloca una gladiola o una flor de diente de león en una solución de pintura vegetal dos horas antes de la actividad experimental. Deja reposar durante 24 horas en agua la zanahoria.

  1. Elabore una preparación temporal de epidermis de cebolla sin aplicar ningún colorante, efectúe en el microscopio óptico una observación a 4X y otra a 10x.
  2. Aplique una gota de azul de metileno y repita la observación a menor y mayor aumento.

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Práctica 5 Teoría de la Generación espontánea

Introducción Desde tiempos antiguos se propusieron diferentes hipótesis y teorías para comprender el origen de la vida. Las primeras explicaciones se basaron en un origen divino, es decir, sostenían que la creación del universo y de la vida ocurrió por un ser supremo y sobrenatural. Posteriormente, el ser humano comenzó a poner mayor atención en la observación directa de fenómenos que ocurrían a su alrededor y de estas observaciones surgió la Teoría de la generación espontánea, en la cual se creía que los seres vivos se originaban de materia en descomposición. La explicación del origen de los seres vivos mediante generación espontánea dominó el pensamiento científico durante mucho tiempo, hasta que se iniciaron una serie de experimentos que culminaron con la demostración de que tal teoría carece de validez. Objetivos Reconoce una de las propuestas que explican el origen de la vida. Materiales y Métodos Metodología Prepara un litro de medio de cultivo de caldo soya-trípticasa, de acuerdo con las instrucciones de la etiqueta de este. Sin esterilizarlo, distribúyelo en 4 matraces de 250 ml. Estos se utilizarán en los experimentos II, III y IV. EXPERIMENTO DE REDI.

  1. Corta la carne de res en tres pedazos iguales.
  2. Coloca un trozo en cada frasco y enuméralos del 1 al 3
  3. Deja destapado el frasco No. 1
  4. Coloca una gasa, sujetada con una liga en el frasco No. 2
  5. Al frasco No. 3 colócale su tapa original y ciérralo perfectamente.

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  1. Coloca los frascos en un lugar a la intemperie y observa diariamente los frascos durante 8 días y detecta la presencia de huevecillos o larvas. EXPERIMENTO DE NEEDHAM
  2. Toma una de los matraces que contienen el medio de cultivo previamente disuelto y calienta con flama suave durante 5 minutos. (MATRAZ No. 1)
  3. Tapa el matraz con una gasa delgada.
  4. Obsérvalo durante ocho días y registra los cambios presentados. EXPERIMENTO DE SPALLANZANI
  5. Toma otro matraz con medio de cultivo y pon a hervir durante 20 minutos.
  6. Retira con cuidado el matraz y coloca un tapón esterilizado de inmediato en la abertura.
  7. Durante 8 días observa y registra los cambios que encuentres (MATRAZ No. 2) EXPERIMENTO DE PASTEUR.
  8. Toma los dos matraces restantes con medio de cultivo y coloca en uno de ellos un corcho con una perforación.
  9. Inserta en la perforación un tubo en forma de "S" (MATRAZ No. 3)
  10. Mantén destapado el otro matraz (MATRAZ No. 4)
  11. Calienta ambos matraces hasta ebullición y mantenlos así durante 20 minutos.
  12. Observa diariamente durante 8 días el anota lo sucedido. Resultados Discusión Discutir los resultados con base a lo reportado por otros autores.

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Práctica 6 Respiración celular

Introducción La respiración celular es un conjunto de reacciones mediante las cuales la célula obtiene la energía necesaria para llevar a cabo sus funciones. La respiración en los organismos puede ser aerobia cuando requiere de oxígeno y anaerobia cuando se realiza en ausencia de éste. Algunos organismos fermentadores, hongos y bacterias, son anaerobios, aunque algunos son facultativos, esto es, que se adaptan a las circunstancias; si hay oxígeno son aerobios y si no hay se vuelven anaerobios. Desde el punto de vista evolutivo, el primer proceso que desarrollaron las células para extraer energía de los alimentos fue la respiración anaerobia. La respiración aerobia se inicia por un proceso anaeróbico “glucólisis”. La glucólisis o respiración anaerobia se efectúa en ausencia de oxígeno y fuera de la mitocondria. Consiste en la degradación de la glucosa para formar dióxido de carbono y alcohol etílico. Cuando las levaduras crecen sin oxígeno su energía procede de la respiración anaerobia de azúcares, como la glucosa. Objetivos Reconoce el proceso de respiración anaerobia a partir de la actividad práctica. Materiales y Métodos Metodología EXPERIMENTO 1

  1. Coloca 3 ml. de jugo en un tubo de ensayo (tubo N 1) y 3 ml. En otro (tubo N 2)
  2. Al tubo N 1 agrégale 1 gr. de levadura. Deja fermentar por 10min.
  3. Agrega a ambos tubos 4 gotas de reactivo de Fehlig A y 4 gotas de reactivo de Fehlig B.
  4. Calienta en baño María y observa si hay cambio de color en los tubos. EXPERIMENTO 2
  5. Coloca 10 g de levadura de pan en un matraz Erlenmeyer de 250ml
  6. Agrega 100.ml de solución de glucosa a 5%

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  1. Tapa la boca del matraz con un globo
  2. Deja fermentar por 10 min
  3. Observa cambios en el globo EXPERIMENTO 3
  4. Coloca 100 ml de agua en un matraz Erlenmeyer
  5. Agrega 2 gotas de azul de bromotimol para obtener un color azul tenue en la solución
  6. Con la ayuda de un popote, burbujea en el agua hasta observar un cambio de color.
  7. Toma el tiempo requerido para obtener el cambio Resultados Discusión Discutir los resultados con base a lo reportado por otros autores. Conclusiones Sintetizar brevemente los puntos más relevantes, aportando los conocimientos explorados a lo largo de la experimentación. Cuestionario
  8. ¿Cuál es el gas que se libera en el proceso de fermentación?
  9. ¿Qué forma tienen las levaduras?
  10. Anota la ecuación general de la fermentación Bibliografía Becker, W. M., Kleinsmith, L. J., Hardin, J. 2006. El Mundo de la Célula. Pearson-Addison Wesley, México. Karp, G. 2009. Biología Celular y Molecular: conceptos y experimentos. McGraw Hill. México. Lodish, H., Beerk, A., Zipursky, L., Matsudaira, P., Baltimore, D., Darnell, J. 2002. Biología Celular y Molecular. Médica Panamericana. México.