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PROTEINAS Y AMINOACIDOS
Resultados Reacción de Biuret Esta reacción es positiva cuando la molécula contiene dos uniones peptídicas o mas, cercanas entre si (es decir, tripéptidos en adelante). Se realiza tratando la solución a ensayar con CuSO 4 en medio alcalino de NaOH. Se observa el color violeta indicador de la presencia de proteínas en ambas muestras Las proteínas dan color violeta, las peptonas (PM mayor 5000) color rojo- morado. El color desarrollado se debe a la formación de un complejo de coordinación con el Cu++
Reacción xantoproteica Se lleva a cabo agregando a la muestra a ensayar (por ej. clara de huevo, o leche) ácido nítrico concentrado en caliente: El color amarillo indica la presencia de aminoácidos con anillos aromáticos en su estructura La reacción es positiva para prótidos que contienen aminoácidos con anillos aromáticos. En la reacción estos anillos se nitran, por lo que aparece el color amarillo intenso de sus derivados nitrados.
Reconocimiento de aminoácidos que poseen azufre Los aminoácidos sulfurados se descomponen al tratarlos con solución de NaOH en caliente, formando sulfuro de sodio como producto. Éste se pone en evidencia acidificando con un ácido concentrado y colocando en la boca del tubo un papel mojado con acetato de Pb:
Ensayo de reconocimiento de aminoácidos con azufre Se observa la formación de un sóludo negro-amarronado de sulfuro de plomo: Mancha característica del sulfuro de plomo en el papel Ensayos de desnaturalización de proteinas: Si se somete a las proteínas a la acción de ciertos agentes que trastornan su organización, se alteran sus propiedades físicas, químicas y biológicas naturales , y se dice que las proteínas se desnaturalizan. Usualmente, debido a la menor solubilidad en agua de la proteína desnaturalizada se observa la precipitación en la forma de un sólido blanco. Si se ensaya la albúmina del huevo frente a calor, alcohol etílico, sales neutras (como sulfato de amonio) o a la presencia de un ácido, se observa lo siguiente: Efecto de diferentes agentes desnaturalizantes sobre la proteina testigo (albúmina de huevo)
Resultado positivo: un resultado positivo está representado por la formación de un anillo blanco (proteína precipitada) en la unión de las dos capas diferentes. Esto indica la presencia de proteínas en la muestra dada. Resultado negativo: un resultado negativo está representado por la ausencia de un anillo blanco. Esto indica la ausencia de proteína en la muestra. Reacción de Molisch La formación del anillo de color púrpura ocurre en la interfaz entre el ácido sulfúrico y la solución de prueba. El ácido sulfúrico permanece por encima de la solución de prueba ya que el ácido es más denso que la solución de prueba. La ausencia de color indica un resultado negativo.
